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目的:L-高苯丙氨酸(L-HPA)是一类非天然的手性α-氨基酸,L-HPA及其酯是合成血管紧张素转换酶抑制剂类药物的重要原料;2-苯乙醇(2-PEA)是一种具有柔和细腻玫瑰花芳香的高级芳香醇;二者具有高附加值。本研究旨在选育一株能够同时生成L-HPA和2-PEA的酿酒酵母,并优化其生物转化反应工艺,实现在一个反应过程中联产L-HPA和2-PEA的目标。方法:克隆来源于E.coliBL21(DE3)的aspC基因,以来源于pGBKT7质粒的ADH1启动子和ADH1终止子为调控元件,以大肠杆菌-酵母菌穿梭质粒YEp352为载体,构建重组表达质粒,采用醋酸锂转化法转化至酿酒酵母中。对反应体系、诱导条件以及反应条件等工艺进行优化,并利用高效液相色谱法(HPLC)检测重组酵母发酵生产L-HPA和2-PEA的产量。结果:1、从实验室保存的酵母菌株中筛选出一株能转化合成L-HPA和2-PEA的酿酒酵母YS58。2、成功构建了表达天冬氨酸转氨酶(AAT)的重组酵母YS-4。重组酵母YS-4与宿主菌株YS58相比,生长情况无明显差异,而转氨酶活性提高了 5倍左右。3、乙醇诱导AAT表达的最佳浓度为0.5%;联产L-HPA和2-PEA的最佳反应体系是:蛋白胨4g/L,2-氧代-4-苯基丁酸(OPBA)10g/L,L-苯丙氨酸(L-Phe)15g/L,初始葡萄糖浓度60g/L;最适反应条件是:反应温度30℃,初始pH值9.4,装液量30%,转化时间48h。在上述条件下,以重组酵母YS-4生成L-HPA的产量达到43.7mmol/L,2-PEA的产量达到32.4mmol/L,与宿主菌株YS58相比分别提高了 78.9%和 6.52%。结论:酿酒酵母YS58能够同时催化生成L-HPA和2-PEA;在转入大肠杆菌中的aspC基因后重组酵母YS-4有效提高了 L-HPA和2-PEA的产量;经工艺优化后,合成L-HPA和2-PEA的两条途径几乎完全偶联,实现了酵母菌联产L-HPA和2-PEA的目标;在该体系中酿酒酵母具有良好的辅酶再生系统,无需额外添加昂贵的辅酶。本研究具有潜在的工业化价值。