粮食及动物制品中真菌毒素及其隐蔽型多组份定量技术研究

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真菌毒素是对人、动物、农作物有毒的物质,它是真菌的二级代谢物。该类毒素在农业领域最为常见,其中玉米赤霉烯酮毒素由镰刀菌(Fusarium species)主要感染玉米、小麦、燕麦。玉米呕吐毒素是由禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)代谢产生的对人体有害的代谢产物,它主要分A型和B型,他们对人体有致癌毒性,误食超过限量标准会引起呕吐等生理反应,严重威胁人类饮食安全。目前,玉米烯酮类毒素、呕吐毒素及它们的隐蔽型毒素定量检测技术是食品毒素筛查和风险评估中非常重要方法,关于玉米赤霉烯酮类毒素ZEN、ZAN、α-ZOL、β-ZOL、α-ZAL、β-ZAL和呕吐类毒素DON、15A-DON、3A-DON、D3G定量技术研究已经由很多报道,这些研究主要集中在食品、农作物、饲料等方面,在动物组织中这类报道相对较少,尤其是其隐蔽性毒素定量技术相关报道更少,本研究通过建立食品和动物中隐蔽型毒素的质谱检测方法,为真菌毒素及其隐蔽型毒素筛查和风险评估提供技术支持。1.真菌毒素及隐蔽型结构在动物组织、器官中的检测一直是业界的难点。本研究利用三重四级杆质谱技术建立了9种玉米赤霉烯酮类毒素在生猪组织(心、肝、脾、肉)中的检测方法实验证明采用分散固相萃取技术处理组织样本,可以得到很好的线性和准确度,9种玉米赤霉烯酮类毒素的在2-1000 ng/mL浓度范围内线性良好,定量限在1-2 ng/mL,检测限在0.5-1 ng/mL,日内和日间精密度RSDR<15%,回收率在70%-110%。实验证明此方法同时检测猪肉中9种真菌毒素高效、便捷、安全。可以应用到肉制品中玉米赤霉烯酮类毒素检测和风险评估。2.目前,我国尚无包括呕吐毒素隐蔽毒素在内的多种毒素同时检测标准方法,而由于呕吐毒素污染较广,实际检测需求大。因此高效的、适用于批处理,以及多组分同时测定(LC-MS/MS)的方法最为适用。本研究利用串联四级杆质谱技术建立了呕吐类毒素及其隐蔽型毒素的检测方法,该方法在2-1000 ng/mL浓度范围内的标曲R~2=0.998-0.999,定量限为10-20 ng/mL,检测限在5-10 ng/mL,平均回收率为79.6%-112.2%,重复性(RSD)(n=5)<20%,根据欧盟的技术要求能够满足小麦、大米及玉米中相应呕吐毒素及其隐蔽型毒素的检测要求。实验证明呕吐毒素及其衍生型、隐蔽型等多组分的LC-MS/MS检测,简单可行,灵敏度高,重现性好,适用于分析实验室中多种应用,如粮食中多种毒素的日常监控。
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