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目的：研究护肝布祖热颗粒抗小鼠急性肾损伤的药效及作用机制，为其在临床应用方面提供科学依据。
方法：采用高效液相色谱法，以乙腈-0.05%磷酸水梯度洗脱，于254nm和327nm条件下，分析护肝布祖热颗粒中的成分。雄性Balb/c小鼠，腹腔注射顺铂(13mg/kg)，建立顺铂致小鼠急性肾损伤模型，护肝布祖热颗粒低(1.6 g/kg)、中(3.2 g/kg)、高(6.4g/kg)剂量组灌胃给药，肾炎康复片(1.2g/kg)为阳性对照药。观察护肝布祖热颗粒对小鼠生长状态、行为的影响；取小鼠肾脏、肝脏称重计算脏器系数，观察肾脏外观；同时，肾脏切片H&E染色观察各组小鼠肾脏组织的病理变化；生化试剂盒测定血清肌酐、尿素氮含量。进一步进行护肝布祖热颗粒抗小鼠急性肾损伤机制研究，利用ROS冰冻切片染色观察肾脏组织中ROS的量；凋亡染色观察肾脏组织中细胞凋亡情况；生化试剂盒检测氧化应激相关指标MDA、GSH、CAT、SOD；ELISA试剂盒检测血清中炎症因子IL-6、TNF-α、IL-1β水平；免疫组化和WB检测NLRP3/Caspase-1信号通路和TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白表达情况。
结果：高效液相色谱法分析护肝布祖热颗粒中含有绿原酸、槲皮素、山奈酚、芹菜素、槲皮苷等。除空白组外，其余各组小鼠均出现精神不振，毛色暗淡等不良情况，护肝布祖热颗粒各剂量组不同程度改善了顺铂造模小鼠精神萎靡，毛色暗淡等不良状况；与空白组相比，模型组小鼠的肾脏系数极显著升高(P＜0.01)，护肝布祖热颗粒各给药组均极显著地降低了小鼠的肾脏系数(P＜0.01)；H&E染色结果显示，空白组肾脏组织结构正常，而模型组肾脏组织的正常结构明显被破坏，显现很多大的空泡，肾小管细胞排列散乱，护肝布祖热颗粒组显示肾损伤的组织学特征明显改善，空泡减少，肾小管细胞排列趋于整齐；与空白组相比，模型组小鼠血清中肌酐和尿素氮水平均显著升高(P＜0.01)，护肝布祖热颗粒各给药组小鼠血清中肌酐和尿素氮水平均显著降低(P＜0.01)；ROS染色结果表明，与空白组相比，模型组肾脏切片荧光强度明显增强，护肝布祖热颗粒各给药组肾脏切片荧光强度明显减弱；与空白组相比，模型组小鼠肾脏组织中MDA含量显著升高(P＜0.01)，GSH含量显著降低(P＜0.05)，护肝布祖热颗粒各给药组小鼠肾脏组织中MDA含量均显著降低(P＜0.01)，而GSH含量有所升高；与空白组相比，模型组小鼠肾脏组织中CAT、SOD的活性显著降低(P＜0.01)，护肝布祖热颗粒各给药组与模型组相比小鼠肾脏组织中CAT、SOD的活性显著升高(P＜0.01)；凋亡染色显示，与空白组相比，模型组肾脏中凋亡阳性表达明显增强，护肝布祖热颗粒各给药组肾脏中凋亡阳性表达明显降低；与空白组相比，模型组小鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6的含量显著升高(P＜0.01)，与模型组相比，护肝布祖热颗粒各给药组小鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6的含量显著降低(P＜0.01或P＜0.05)；免疫组化和WB检测结果表明，相对于模型组，护肝布祖热颗粒各给药组NLRP3、Caspase-1、IL-18、IL-1β、TLR4、NF-κB、IL-6、TNF-α的表达下调。
结论：1、护肝布祖热颗粒对急性肾损伤小鼠有一定的保护作用；2、护肝布祖热颗粒通过抗氧化应激、抑制组织细胞凋亡、降低血清中炎症因子的水平保护急性肾损伤小鼠；3、护肝布祖热颗粒通过抑制NLRP3/Caspase-1信号通路和TLR4/NF-κB信号通路抗小鼠急性肾损伤。本研究明确了传统维药复方护肝布祖热颗粒对急性肾损伤的药效，从整体动物药效和分子机制层面初步阐明了护肝布祖热颗粒抗小鼠急性肾损伤的作用机制，为其临床应用提供科学依据。
方法：采用高效液相色谱法，以乙腈-0.05%磷酸水梯度洗脱，于254nm和327nm条件下，分析护肝布祖热颗粒中的成分。雄性Balb/c小鼠，腹腔注射顺铂(13mg/kg)，建立顺铂致小鼠急性肾损伤模型，护肝布祖热颗粒低(1.6 g/kg)、中(3.2 g/kg)、高(6.4g/kg)剂量组灌胃给药，肾炎康复片(1.2g/kg)为阳性对照药。观察护肝布祖热颗粒对小鼠生长状态、行为的影响；取小鼠肾脏、肝脏称重计算脏器系数，观察肾脏外观；同时，肾脏切片H&E染色观察各组小鼠肾脏组织的病理变化；生化试剂盒测定血清肌酐、尿素氮含量。进一步进行护肝布祖热颗粒抗小鼠急性肾损伤机制研究，利用ROS冰冻切片染色观察肾脏组织中ROS的量；凋亡染色观察肾脏组织中细胞凋亡情况；生化试剂盒检测氧化应激相关指标MDA、GSH、CAT、SOD；ELISA试剂盒检测血清中炎症因子IL-6、TNF-α、IL-1β水平；免疫组化和WB检测NLRP3/Caspase-1信号通路和TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白表达情况。
结果：高效液相色谱法分析护肝布祖热颗粒中含有绿原酸、槲皮素、山奈酚、芹菜素、槲皮苷等。除空白组外，其余各组小鼠均出现精神不振，毛色暗淡等不良情况，护肝布祖热颗粒各剂量组不同程度改善了顺铂造模小鼠精神萎靡，毛色暗淡等不良状况；与空白组相比，模型组小鼠的肾脏系数极显著升高(P＜0.01)，护肝布祖热颗粒各给药组均极显著地降低了小鼠的肾脏系数(P＜0.01)；H&E染色结果显示，空白组肾脏组织结构正常，而模型组肾脏组织的正常结构明显被破坏，显现很多大的空泡，肾小管细胞排列散乱，护肝布祖热颗粒组显示肾损伤的组织学特征明显改善，空泡减少，肾小管细胞排列趋于整齐；与空白组相比，模型组小鼠血清中肌酐和尿素氮水平均显著升高(P＜0.01)，护肝布祖热颗粒各给药组小鼠血清中肌酐和尿素氮水平均显著降低(P＜0.01)；ROS染色结果表明，与空白组相比，模型组肾脏切片荧光强度明显增强，护肝布祖热颗粒各给药组肾脏切片荧光强度明显减弱；与空白组相比，模型组小鼠肾脏组织中MDA含量显著升高(P＜0.01)，GSH含量显著降低(P＜0.05)，护肝布祖热颗粒各给药组小鼠肾脏组织中MDA含量均显著降低(P＜0.01)，而GSH含量有所升高；与空白组相比，模型组小鼠肾脏组织中CAT、SOD的活性显著降低(P＜0.01)，护肝布祖热颗粒各给药组与模型组相比小鼠肾脏组织中CAT、SOD的活性显著升高(P＜0.01)；凋亡染色显示，与空白组相比，模型组肾脏中凋亡阳性表达明显增强，护肝布祖热颗粒各给药组肾脏中凋亡阳性表达明显降低；与空白组相比，模型组小鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6的含量显著升高(P＜0.01)，与模型组相比，护肝布祖热颗粒各给药组小鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6的含量显著降低(P＜0.01或P＜0.05)；免疫组化和WB检测结果表明，相对于模型组，护肝布祖热颗粒各给药组NLRP3、Caspase-1、IL-18、IL-1β、TLR4、NF-κB、IL-6、TNF-α的表达下调。
结论：1、护肝布祖热颗粒对急性肾损伤小鼠有一定的保护作用；2、护肝布祖热颗粒通过抗氧化应激、抑制组织细胞凋亡、降低血清中炎症因子的水平保护急性肾损伤小鼠；3、护肝布祖热颗粒通过抑制NLRP3/Caspase-1信号通路和TLR4/NF-κB信号通路抗小鼠急性肾损伤。本研究明确了传统维药复方护肝布祖热颗粒对急性肾损伤的药效，从整体动物药效和分子机制层面初步阐明了护肝布祖热颗粒抗小鼠急性肾损伤的作用机制，为其临床应用提供科学依据。