【摘 要】
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目的:探讨植物雌激素毛蕊异黄酮对MCF-7、MDA-MB-231人乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力的影响,以及Rab27B介导的信号通路在其中的作用机制。方法:体外实验中,分别以不同浓度毛蕊异黄酮（0、50、100、150、200μM）处理MCF-7和MDA-MB-231细胞后,采用划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,采用q RT-PCR和Western blot检测细胞中Rab27
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目的:探讨植物雌激素毛蕊异黄酮对MCF-7、MDA-MB-231人乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力的影响,以及Rab27B介导的信号通路在其中的作用机制。方法:体外实验中,分别以不同浓度毛蕊异黄酮（0、50、100、150、200μM）处理MCF-7和MDA-MB-231细胞后,采用划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,采用q RT-PCR和Western blot检测细胞中Rab27B表达水平;构建针对Rab27B的过表达或sh RNA干扰重组慢病毒载体,建立稳定转染的MCF-7和MDA-MB-231人乳腺癌细胞株;采用Transwell实验和划痕实验检测Rab27B过表达或敲低对MCF-7和MDA-MB-231细胞迁移和侵袭能力的影响,以及毛蕊异黄酮干预后的变化;采用q RT-PCR和Western blot检测Rab27B过表达或敲低后MCF-7和MDA-MB-231细胞中β-catenin和VEGF表达水平,以及毛蕊异黄酮干预后的变化。体内实验中,经尾静脉注射MDA-MB-231细胞建立人乳腺癌裸鼠转移模型,腹腔注射给予荷瘤鼠不同浓度的毛蕊异黄酮（0、60mg/kg、90mg/kg）治疗,观察荷瘤鼠生长状态、成瘤情况以及转移瘤组织中Rab27B、β-catenin和VEGF的表达水平。结果:体外实验中,毛蕊异黄酮可以呈浓度依赖性抑制MCF-7和MDA-MB-231细胞的迁移、侵袭能力,下调两种细胞中Rab27B的表达（P＜0.05或P＜0.01）;相较于对照组,Rab27B过表达可显著促进两种乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力（P＜0.05）,促进β-catenin和VEGF表达（P＜0.05）,Rab27B表达下调则对乳腺癌细胞转移能力和β-catenin、VEGF表达有着相反作用。与毛蕊异黄酮单独处理组相比,Rab27B基因表达下调可进一步增强毛蕊异黄酮对于MCF-7和MDA-MB-231细胞侵袭转移能力的抑制作用（P＜0.05）,进一步减少细胞中β-catenin和VEGF的表达（P＜0.05）,而毛蕊异黄酮所介导的乳腺癌抑制效应可为Rab27B过表达所抵消（P＜0.05）。在体内实验中,毛蕊异黄酮可明显减少人乳腺癌荷瘤祼鼠体内肺转移结节数（P＜0.05）,降低肺转移瘤组织中Rab27B、β-catenin和VEGF的表达（P＜0.05）。结论:毛蕊异黄酮可降低人乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能是通过抑制Rab27B-β-catenin-VEGF信号通路所实现,这将为临床治疗乳腺癌提供新途径和新靶点。
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