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目的： 肝癌作为一种比较常见的消化系统疾病，在全世界范围内，发病率排在所有肿瘤发病率的第六位，死亡率则排在所有肿瘤死亡率的第三位。近些年，随着乙肝疫苗的接种等预防措施的实施，肝癌的发病率得到了一定的抑制，但是总体上来说，肝癌的发病率、死亡率仍在逐年增高，严重危害人类健康。轮叶党参作为一种多年生蔓生草本，富含丰富的黄铜类、生物碱类以及三萜类化合物等生物活性物质，具有补中益气、排脓消肿及清热解毒等作用。本实验通过体内DEN致癌实验，探讨轮叶党参对肝癌的预防作用及其具体作用分子靶点。 方法： ①轮叶党参经过水提、已醇沉淀、石油醚以及乙酸乙酯萃取、D-101大孔吸附树脂过柱、乙醇：蒸馏水洗脱等步骤得到轮叶党参总皂苷。②小鼠体内DEN致癌实验，动物分组为：阴性对照组，DEN组，轮叶党参高剂量组（200mg/kg）、轮叶党参中剂量组（100mg/kg）、轮叶党参低剂量组（50mg/kg）。阴性对照组每日灌胃蒸馏水；DEN组和轮叶党参不同剂量组隔日腹腔注射DEN20mg/kg，同时轮叶党参组每日灌胃不同剂量的轮叶党参，连续5周后肝组织进行石蜡包埋、切片、HE染色，显微镜下计数核分裂相、枯否细胞数。③肝组织匀浆，取上清液，采用酶动力学法测定肝组织匀浆上清液中GSTs、MDA含量；采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测肝组织匀浆上清液中 TNF-α含量；采用考马斯亮蓝法测定匀浆液中的蛋白含量。④肝组织石蜡切片，采用SABC法检测肝组织中 P53、PCNA、C-myc表达。⑤肝组织匀浆，采用western及IP细胞裂解液提取蛋白，根据轮叶党参不同药物浓度，采用聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳检测 COX-2表达。⑥大鼠急性毒性实验，动物分组：阴性对照组(ddH2O)，DEN组(200mg/kg)，轮叶党参高剂量组（200mg/kg）、轮叶党参中剂量组（100mg/kg）、轮叶党参低剂量组（50mg/kg）。实验第7天给予DEN，24h后，处死，采用差异离心法提取肝微粒体混合功能氧化酶，酶联免疫吸附法（ELISA）测定其中CYP450含量。 结果： 1.肝组织HE染色结果显示：DEN组与阴性对照组相比，可以显著增加核分裂像及枯否细胞的的表达(P<0.01)。高剂量组肝组织中仍可见少量核分裂相、枯否细胞、炎症细胞及细胞水肿，但病变程度与DEN组比较明显减轻(P<0.01)。中剂量组肝组织病变与DEN组比较，核分裂像、枯否细胞、均相对减少(P<0.05)。 2.肝组织匀浆上清液酶动力学法及酶联免疫吸附法测定结果显示：DEN组与阴性对照组相比，显著增加MDA，TNF-α含量(P<0.05或P<0.01)，同时显著降低GSTs含量。高、中剂量组与DEN组相比显著降低MDA，TNF-α含量(P<0.01)，并增加GSTs活性(P<0.01)。低剂量组与DEN组相比显著降低MDA含量(P<0.01)。 3.石蜡切片免疫组化结果显示：在本次实验组肝组织中 P53蛋白未检测出，检测结果为阴性。DEN组肝组织中PCNA表达明显高于阴性对照组（P<0.01）；轮叶党参高剂量组肝组织中PCNA表达明显低于DEN组（P<0.05）；轮叶党参中剂量组肝组织中PCNA表达明显低于DEN组（P<0.01）。DEN组肝组织中C-myc表达明显高于阴性对照组（P<0.01）；轮叶党参高、中剂量组肝组织中C-myc表达明显低于DEN组（P<0.01）；轮叶党参低剂量组肝组织中C-myc表达明显低于DEN组，（P<0.05）。 4.肝组织蛋白电泳结果：DEN组肝组织中COX-2表达明显高于阴性对照组（P<0.05）；轮叶党参高、低剂量组肝组织中COX-2表达明显低于DEN组，差异具有统计学意义（P<0.05）；高、低剂量组间比较没有统计学差异。 5.大鼠急性毒性实验细胞色素 P450含量测定： DEN组肝组织中细胞色素P450表达明显高于阴性对照组（P<0.01）；轮叶党参低剂量组肝组织中细胞色素P450表达明显低于DEN组，差异具有统计学意义（P<0.01）； 结论： 1.轮叶党参减少肝组织中核分裂相个数及枯否细胞个数，可有效阻止DEN所致细胞恶变的进展并减轻DEN所致炎症损伤。 2.轮叶党参提高肝组织中GSTs活性，降低肝组织中脂质过氧化程度，清除过多的自由基,降低肝组织中TNF-α及MDA含量，阻止DEN诱导的病理性核分裂，对DEN致肝脏损伤有较好的预防作用。 3.轮叶党参降低肝组织中PCNA、C-myc的表达，有效抑制肝细胞的过度分裂增殖。 4.轮叶党参降低肝组织中COX-2的表达，促进肝细胞凋亡，抑制增殖。 5.轮叶党参降低肝组织中各组细胞色素P450含量，抑制致癌物活化。