【摘 要】
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本论文对中药半边莲挥发油化学成分、含量测定及抗肿瘤药效作用进行研究。首先用不同提取方法提取半边莲挥发油并对选择的提取方法进行优化,采用气质联用技术对来自全国十二个省份18批半边莲挥发油样品化学成分进行鉴定,并建立共有成分指纹图谱,分析不同产地半边莲挥发油化学成分差异。采用多反应监测（MRM）对挥发油中4个成分建立含量测定方法。采用MTT法测定半边莲挥发油对四种不同肿瘤细胞的体外抗肿瘤活性,筛选出敏
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本论文对中药半边莲挥发油化学成分、含量测定及抗肿瘤药效作用进行研究。首先用不同提取方法提取半边莲挥发油并对选择的提取方法进行优化,采用气质联用技术对来自全国十二个省份18批半边莲挥发油样品化学成分进行鉴定,并建立共有成分指纹图谱,分析不同产地半边莲挥发油化学成分差异。采用多反应监测（MRM）对挥发油中4个成分建立含量测定方法。采用MTT法测定半边莲挥发油对四种不同肿瘤细胞的体外抗肿瘤活性,筛选出敏感细胞株,通过建立谱效关系揭示指纹图谱中特征成分与抗肿瘤活性的相关性,为半边莲挥发油的进一步开发和利用提供依据。1、半边莲挥发油化学成分与指纹图谱研究本研究考察了甲醇超声法、石油醚超声法、水蒸气蒸馏法、索氏提取法及其甲酯化法对半边莲挥发性成分提取效果的影响,最终确定采用水蒸气蒸馏法进行提取,采用正交试验设计优化水蒸气蒸馏法浸泡时间、提取时间、料液比等因素,确定了水蒸气蒸馏法提取半边莲挥发油的最佳提取方法。采用GC-MS法建立了半边莲挥发油特征成分指纹图谱并对其化学成分进行了鉴定,经谱库检索结合保留指数法共鉴定了指纹图谱的72种成分,并分析了全国12个省份18批半边莲挥发油样品化学成分差异。所鉴定的成分占总检出成分的86.47%,主要为萜类化合物及其衍生物、脂肪酸类,如植酮（12.75%）、芳樟醇（1.49%）、棕榈酸（14.77%）等。以正十五碳醛为参照峰,共标定了28个特征峰,各批次半边莲指纹图谱与对照指纹图谱相似度均大于0.9,所建立的指纹图谱为半边莲挥发油的质量评价提供了方法依据。2、半边莲含量测定研究首次建立了半边莲中芳樟醇、百里酚、β-石竹烯、对乙烯基愈创木酚这四种成分含量测定方法,采用MRM数据采集方式,通过产物离子扫描确定定性定量离子对与最佳碰撞电压,完成GC-MS参数设定。采用内标法,以水杨酸甲酯为内标物,测定4种成分的含量。结果表明半边莲挥发油中芳樟醇、百里酚、对乙烯基愈创木酚、β-石竹烯的平均含量分别为0.9418μg/g、0.3713μg/g、10.99μg/g、0.1954μg/g。3、半边莲挥发油抗肿瘤药效作用及谱效关系研究采用MTT法,考察半边莲挥发油对不同肿瘤细胞的抗肿瘤活性,筛选出敏感细胞株。半边莲挥发油具有良好的浓度依赖性抗肿瘤细胞增殖活性,半边莲挥发油对HCT-116的IC50值为216.4μg/m L,对MDA-MB-231的IC50值为410.8μg/m L、对Hep G2和A549的IC50值分别729.3μg/m L、894.0μg/m L。四种肿瘤细胞中,半边莲挥发油对HCT-116细胞的抑制作用最好,对Ge2和A549的抗肿瘤作用较弱,实验表明半边莲挥发油对HCT-116细胞具有一定的肿瘤抑制效果。经灰色关联度法所得谱效关系结果表明植酮、香叶基丙酮、肉豆蔻酸、对乙烯基愈疮木酚、正十五碳醛等物质可能是发挥肿瘤抑制作用的药效成分。
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