【摘 要】
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背景脂肪源干细胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）因其具有抗炎活性、促进组织新生、来源丰富及易取材等优点,已经具备广阔的应用前景。但有关脂肪源干细胞对口腔溃疡的治疗作用报道甚少,因此了解其在口腔溃疡（oral ulcer,OU）修复过程中的作用,可为临床应用ADSCs治疗口腔溃疡提供实验基础。目的通过化学烧灼法制备SD大鼠创伤性口腔溃疡实验动物模型,研究ADSCs
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背景脂肪源干细胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）因其具有抗炎活性、促进组织新生、来源丰富及易取材等优点,已经具备广阔的应用前景。但有关脂肪源干细胞对口腔溃疡的治疗作用报道甚少,因此了解其在口腔溃疡（oral ulcer,OU）修复过程中的作用,可为临床应用ADSCs治疗口腔溃疡提供实验基础。目的通过化学烧灼法制备SD大鼠创伤性口腔溃疡实验动物模型,研究ADSCs在大鼠创伤性口腔溃疡修复过程中的作用。方法1.取3周龄SD大鼠腹股沟区脂肪组织,酶消化法分离纯化ADSCs,原代培养,倒置显微镜观察其形态特征,采用细胞免疫荧光法对ADSCs进行鉴定。2.75只SD大鼠运用化学烧灼法成功制备创伤性口腔溃疡实验动物模型,造模完成后随机分为3组:A:阴性对照组（生理盐水组）、B:桂林西瓜霜组、C:ADSCs组,每组各25只。另外6只SD大鼠用来进行模型鉴定。各治疗组分别在用药的第3天、第5天和第8天随机挑选5只大鼠观察溃疡愈合程度并处死,采用HE染色法观察SD大鼠口腔溃疡黏膜组织的病理学变化,免疫组化法检测各组角蛋白-19（CK19）、表皮生长因子（EGF）的阳性表达情况。各组10只SD大鼠用来观察并记录溃疡具体愈合时间。结果1.分离、培养的大鼠ADSCs细胞阳性表达CD44和CD90。2.肉眼观察治疗第3天,阴性对照组周围组织充血水肿明显,溃疡表面可见一层较厚的假膜覆盖;桂林西瓜霜组和ADSCs组周围组织充血水肿减轻,溃疡表面较厚假膜脱落,仅有少量假膜黏连;治疗第5天,阴性对照组个别大鼠充血水肿减轻;桂林西瓜霜组无明显变化;ADSCs组充血不明显,溃疡面积减小;治疗第8天,阴性对照组溃疡表面假膜脱落;桂林西瓜霜组个别大鼠溃疡面积减小;ADSCs组大部分大鼠溃疡愈合,新生黏膜完全覆盖溃疡面,个别大鼠原溃疡处呈点状充血。3.组织病理学变化治疗第3天,阴性对照组、桂林西瓜霜组和ADSCs组上皮均不完整,大量细胞发生空泡变性,炎性细胞浸润;治疗第5天,阴性对照组无明显变化;桂林西瓜霜组浸润的炎性细胞和发生空泡变性的细胞减少;ADSCs组细胞间炎性细胞减少;治疗第8天,阴性对照组仍可见较多炎性细胞;桂林西瓜霜组炎性细胞减少,基底细胞规整;ADSCs组上皮下层可见大量成纤维细胞形成,新生毛细血管生成。4.各组SD大鼠口腔溃疡模型中CK19及EGF表达情况通过免疫组织化学结果显示,在治疗第3天、第5天、第8天,ADSCs组与阴性对照组、桂林西瓜霜组对比,CK19和EGF阳性表达量显著增加（P＜0.001）。5.各组SD大鼠口腔溃疡平均愈合时间阴性对照组愈合时间13.9±1.370 d;桂林西瓜霜组愈合时间11.2±0.919 d;ADSCs组愈合时间8.1±0.876 d,ADSCs组与阴性对照组、桂林西瓜霜组对比,溃疡平均愈合时间明显缩短（P＜0.05）。说明ADSCs能够促进溃疡愈合,缩短溃疡愈合时间。结论大鼠ADSCs对化学烧灼法制备的大鼠创伤性口腔溃疡具有一定修复作用。
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