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大豆为豆科植物大豆Glycinemax(L.)Merr的种子,是我国广泛种植和食用的农作物之一。近年来,大豆异黄酮的研究已经引起人们的关注,特别是大豆异黄酮弱的雌激素作用。广泛应用于食品、药品及化妆品中。本文采用豆粕为原料,以安全无毒溶剂提取大豆异黄酮,在不影响豆粕的饲料营养价值的同时,又可得到高附加值的高纯度大豆异黄酮,提高了豆粕的综合经济效益。高纯度大豆异黄酮具有较大的市场需求。本文对高纯度大豆异黄酮的制备工艺进行了研究,主要内容如下:1)建立了一个大豆异黄酮高效薄层色谱定性分析方法。薄层层析硅胶GF254为固定相,氯仿-甲醇-乙酸(93:7:0.5,v/v/v)为展开剂,大豆黄素和染料木素的Rf值分别为0.47和0.58。2)建立了一个新的大豆异黄酮的薄层扫描定量分析方法,国内未见报道。反射法单波长直线扫描λ=260nm,大豆黄素的线性方程为:Y=120840.5X+1859.1,相关系数r=0.998,线性范围0.3～3μg,精密度RSD为1.72%,平均加样回收率为96.3%;染料木素的线性方程为:Y=108098X+17464.1,相关系数r=0.999,线性范围0.3～3μg,精密度RSD为1.55%,平均加样回收率98.4%。3)建立了大豆异黄酮的反相高效液相色谱定性分析方法,优化了高效液相色谱分析条件。固定相为ApolloC18柱,流动相为:A溶液(1%乙酸水溶液),B溶液(80%甲醇1%乙酸),梯度洗脱0～40min,20%B～100%B,流速为1mL/min,柱温为25℃,检测波长为260nm。大豆黄素的保留时间是37.5min,染料木素的保留时间为40.0min,达到基线分离的要求,同时其它组分也得到较好的分离。大豆黄素的线性方程为Y=15762638X+185870,相关系数r=0.9996,线性范围2～10μg,精密度RSD=1.12%,平均加样回收率为98.1%;染料木素的线性方程为Y=56746926X-87078,相关系数r=0.9995,线性范围2～10μg,精密度RSD=1.41%,平均加样回收率为98.5%。大豆黄素的最小检测限为6.56×10-7μg,染料木素的最小检测限为1.98×10-7μg。4)进行了大豆异黄酮苷提取和水解研究。进行了乙醇回流提取的正交试验,<WP=8>确定了最优条件为:60%乙醇、料液比1:4、提取次数3次、提取时间3h、提取温度60℃。进行了酸水解正交试验,确定了最优反应条件为:1mol/L盐酸、料液比1:2、水解温度65℃、水解时间1h、乙酸乙酯/水解液为2.5:1。5)进行了树脂吸附大豆异黄酮的初步研究,对8种树脂及聚酰胺进行了静态吸附研究,确定各种树脂的吸附量、解吸率以及静态吸附曲线。6)采用薄层制备色谱和制备型加压液相色谱对大豆异黄酮苷元进行了单体纯化试验,得到了高纯度的大豆黄素和染料木素单体。采用MS对样品进行了鉴定。采用LC-MS对豆粕提取物中大豆异黄酮成分进行了研究。7)规模放大试验,从50Kg豆粕中得到23.6g高纯度大豆异黄酮产品,纯度为80%。将提取的高纯度的大豆异黄酮加入化妆品中,研制了美白,预防痤疮以及抗衰老的三种新型化妆品,并拟定了化妆品配方专利申请书。