【摘 要】
：
食管癌（esophageal cancer,ESCA）具有高发病率、低治愈率和高死亡率的特点,其在我国一些高发地区占各种恶性肿瘤首位。近年来,食管癌发病机制的研究已取得重大进展,临床上食管癌的主要治疗方法有外科治疗和化学治疗,因此寻找安全有效的药物成为食管癌治疗中关键的环节之一。车桑子因具有多种功效在多国家被用作民间药物,研究表明车桑子具有抗癌活性且对正常上皮细胞的毒性有限,但目前关于车桑子提取物
论文部分内容阅读
食管癌（esophageal cancer,ESCA）具有高发病率、低治愈率和高死亡率的特点,其在我国一些高发地区占各种恶性肿瘤首位。近年来,食管癌发病机制的研究已取得重大进展,临床上食管癌的主要治疗方法有外科治疗和化学治疗,因此寻找安全有效的药物成为食管癌治疗中关键的环节之一。车桑子因具有多种功效在多国家被用作民间药物,研究表明车桑子具有抗癌活性且对正常上皮细胞的毒性有限,但目前关于车桑子提取物抗癌的研究较少。本实验旨在探究车桑子提取物对食管癌细胞KYSE-150和TE-1的体外作用及部分相关作用机制。主要研究内容如下:CCK-8法检测车桑子提取物对食管癌细胞KYSE-150和TE-1的毒性作用,结果显示车桑子提取物均能抑制食管癌细胞生长并呈时间-剂量依赖性,筛选出抗食管癌效果最明显的南非车桑子正丁醇提取物（Dodonaea viscosa extracted by ethyl acetate,ZA-DV-NBA）,计算各车桑子提取物的IC50,结果显示ZA-DV-NBA的IC50数值均小于其余3种,在KYSE-150和TE-1细胞中的IC50分别为100.8μg/m L,139.3μg/m L。选取不同浓度ZA-DV-NBA处理食管癌细胞KYSE-150和TE-1后,检测细胞生物学变化:CCK8法检测出ZA-DV-NBA能够抑制细胞KYSE-150和TE-1增殖,呈现出明显的剂量-效应关系。克隆形成实验检测出ZA-DV-NBA能够降低细胞KYSE-150和TE-1克隆形成率,降低细胞增殖活力。流式细胞术FITC-Annexin V/PI双染法检测出ZA-DV-NBA能诱导细胞KYSE-150和TE-1发生凋亡。PI染色法发现ZA-DV-NBA能紊乱细胞KYSE-150和TE-1的周期分布,并诱导G2期阻滞。划痕愈合实验和Transwell实验表明ZA-DV-NBA能够抑制食管癌细胞迁移和侵袭。采用生物信息学方法进行分析:Mala Cards数据库分析参与食管癌发生发展的基因,并发现基因H19。Gene Cards信息库分析H19的基因信息并利用转录组测序、芯片以及SAGE检测确认了H19在食管癌中高表达。TCGA数据库分析H19和mi R-675-3p在食管癌中的表达,发现H19在食管癌样本中高表达,表达量随肿瘤分级、分期升高而升高,mi R-675-3p在食管癌中高表达。TCGA数据库进行H19和mi R-675-3p的表达与生存分析,发现H19低表达或中度表达的患者生存获益,并且H19表达越低、肿瘤分级越低的患者生存越获益,mi R-675-3p低表达的食管癌患者生存获益。Target Scan、Pic Tar、MICRORNA.ORG预测食管癌表达谱中的CDK13是mi R-675-3p的靶基因。食管癌细胞KYSE-150和TE-1分别转染H19si RNA、mi R-675-3p inhibition或mi R-675-3p mimics并加药后,探究ZA-DV-NBA抑制食管癌细胞转移机制与H19/mi R-675-3p/CDK13的关系:q RT-PCR检测到实验组细胞KYSE-150和TE-1中H19、mi R-675-3p的m RNA水平下降。划痕愈合实验和Transwell实验检测到实验组细胞KYSE-150和TE-1的迁移和侵袭能力均降低。q RT-PCR和Western Blotting检测到实验组细胞KYSE-150和TE-1中CDK13的m RNA水平和蛋白质表达水平均上升。综上所述,ZA-DV-NBA能够影响食管癌细胞KYSE-150和TE-1的细胞生物学行为,并通过调控信号轴H19/mi R-675-3p/CDK13来调控细胞KYSE-150和TE-1的转移。本文为开展车桑子提取物的药效研究奠定基础,同时也为车桑子药用资源的开发和利用提供了依据,具有明显的理论价值和潜在应用价值。
其他文献
我国刑法学语境的举动犯概念存有分歧,代表性观点有三种,分别是着手实行行为既遂说、着手实行行为犯罪成立说和实施犯罪行为既遂说。尽管近来有着否定举动犯成立的声音,但并未彻底否定举动犯的存立可能性。同时,基于司法实践引用举动犯理论判断相关犯罪既未遂的现实需要,有必要对举动犯这一命题作深入地讨论和分析,以期解决举动犯概念、存在范围等问题。文章除引言外分为四个部分。第一部分是举动犯概述。举动犯的概念界定存在
环境与发展是国际社会普遍关注的重大问题,保护生态环境,实施可持续发展,是当下环境问题解决的重要突破口。环境保护,教育为本;环境教育,伦理为先。环境伦理教育是环境教育的中心与最终目标,具有重要意义。因此,环境伦理教育应该“下移”,融入中小学教育教学当中,是落实伦理教育应该也应当做的事情。化学学科中蕴含着丰富的环境伦理教育素材,充分利用化学学科的环境伦理教育优势,深入挖掘教材中的环境伦理教育教学资源,
线粒体自噬（Mitochondrialautophagy）是选择性清除受损或过量的线粒体的过程,对于维持健康和适量的线粒体具有重要意义。部分帕金森病（Parkinson disease,PD）患者线粒体自噬调节基因Parkin出现突变,提示线粒体自噬异常与帕金森病发病之间存在紧密联系。课题组前期研究发现酪氨酸磷酸酶SHP2通过与ANT1互作维持线粒体稳态从而负调控NLRP3炎症小体的激活,提示SH
随着互联网信息技术的飞速发展,人们在充分享受互联网信息技术带来便利的同时,也面临互联网所附带的负面影响。电信网络诈骗就是利用互联网信息技术实施的新型网络犯罪活动。由于电信网络诈骗犯罪门槛低、成本低、回报高、易隐蔽、追赃难等原因,电信网络诈骗犯罪十分猖獗,其发展势头也异常迅猛。电信网络诈骗严重侵害人民群众的财产安全,损害人民群众合法权益,对受害者身心健康造成重大伤害,影响社会安全稳定,社会危害性较大
2019年中共中央、国务院《关于建立健全城乡融合发展体制机制和政策体系的意见》中首次提出村集体在村民自愿的前提下,可将依法有偿收回的闲置宅基地转为集体经营性建设用地入市。2020年9月20日中央农村工作领导小组办公室、农业农村部发布的《关于进一步加强农村宅基地管理的通知》明确中提到鼓励村集体和农民盘活利用闲置宅基地和闲置住宅,通过自主经营、合作经营、委托经营等方式,依法依规发展农家乐、民宿、乡村旅
习近平总书记曾强调:“要深入贯彻绿水青山就是金山银山的理念,走出一条生态和经济协调发展、人与自然和谐共生之路。”在全球生态环境面临危机的背景下,我国顺应绿色发展的时代需要,在习近平绿色发展观的实践指导下,针对我国自然生态环境发展现状做出了一系列重大决策与改变,生态文明建设迈上新台阶,绿色发展理念已成为全社会的普遍共识。本文立足于我国生态文明建设的现实国情,深入探究习近平绿色发展观提岀的时代背景、理
杏鲍菇（Pleurotus eryngii）是侧耳属的一种重要的珍稀食用菌,具有很高的食用、药用、经济和生态学价值。杏鲍菇具有促进肠胃消化、增强人体免疫力、降血脂、降胆固醇、防止心血管疾病的功效,因此越来越受到消费者的青睐,以至于杏鲍菇的需求量逐年增高。然而,由于目前以杏鲍菇为对象的分子生物学层面的基础研究相对薄弱,在优良品种选育和生物技术应用中缺乏一种可靠的分子生物学工具。食用菌因其遗传规律复杂
腐败是我党面临的最大威胁,党的十八大后,我国反腐倡廉一直处于高压态势。随着大数据时代的到来,公民在廉政建设中的作用越来越突出,我国反腐工作逐渐从以政府为主导的从自上而下的模式开始向以提倡公民自下而上的参与和政府自上而下打击腐败相结合的模式转变。为更清楚地了解大数据时代给公民参与廉政建设带来的机遇以及大数据时代公民参与廉政建设的创新,需要对大数据时代背景下公民参与廉政建设运行机制展开研究。我国大数据
2006年西安市文物保护考古研究院在陕西师范大学长安校区内对隋张綝夫妇合葬墓进行了考古发掘。该墓是一座隋代纪年墓。此墓形制为长斜坡多天井的单室土洞墓,由墓道、过洞、天井、甬道和墓室五部分组成。墓主张綝卒于开皇七年（587）,葬于开皇九年（589）,夫人薛氏卒于大业元年（605）,大业三年（607）与张綝合葬。该墓出土器物150余件,陶俑占据了大多数,并体现出了两种不同的风格。因此,本文首先对张綝夫
上世纪七十年代,河北省文管会发掘渤海高氏家族墓部分墓葬,高雅墓即是此次被发掘的墓葬之一。高雅墓墓主名高雅,郡望渤海,亡于北魏熙平年间（516-518）,重葬于东魏天平四年（537）。其间,破六韩拔陵于正光五年（520）反,北魏开始走向风雨飘摇的政权末期,“明主”逐一登场,北方战乱不已,最后高欢收拾关东,建立东魏政权。高氏政权建立的初期,河北豪族借武力相从之功占一席之地,其中,渤海高氏尤其显赫,高雅