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本研究中,我们主要针对多组分混合物中间组分的制备纯化提出了一种有效、智能、灵活的新方法,此方法结合了批处理色谱(Batch chromatography,BC)以及连续色谱(Continuous chromatography,CC)的运行模式,所以我们称之为连续批处理色谱法(Continuous batch chromatography,CBC)。同时,我们将其应用在制备纯化鱼油乙酯二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic acid ethyl esters,EPA-EE)当中,以此来评估CBC方法的可行性以及有效性。上述的多组分混合物为一类至少包含三组分,且目标组分(中间组分)处于前杂(与固定性亲和力小)与后杂(与固定相亲和力大)之间的一类混合物。我们建立了鱼油乙酯粗品气相色谱方法与液相色谱方法,用于鱼油乙酯中有效成分的定性与定量检测。同时还对鱼油乙酯有效成分的理化性质、色谱性质进了考察,理化性质主要是稳定性与溶解度的考察,而色谱性质主要是对鱼油乙酯中有效成分吸附等温线的考察。通过在三种不同填料上作Van-Deemter曲线确定填料种类,在确定固定相种类为120?-10-ODS-BP之后,通过考察不同比例的甲醇水体系下鱼油乙酯粗品的分离情况,得出流动相比例为95%甲醇。最后再通过考察不同流速下二区、六区的H-u曲线以及分离情况,得出CBC系统洗脱流速为15m L/min。CBC实验过程中,在CBC系统分离原理的指导下,通过批处理洗脱实验确定其操作条件。Ⅰ区的进样时间设置在14-15min;Ⅱ区的相对阈值为940m V,时间窗口选择在2min;Ⅲ区的运行时间为12min;Ⅳ区的运行时间为5.4min;Ⅴ区的运行时间为12min;Ⅵ区的相对阈值为915m V,时间窗口选择在10min;Ⅶ区馏分收集器与泵运行的时间分别为4min和15min。实验结果表明在以500g/L的进样浓度下,CBC得到的EPA-EE平均纯度为97.82%,回收率为82.01%,产能为24.93mg/cm2横截面积/min;产品溶剂消耗量为0.83 L/g;EPA-EE平均纯度高于98.5%的回收率为81.17%。同样色谱条件下,将鱼油粗品样品在批处理色谱上进行制备,两者通过比较得出CBC用来分离纯化EPA的效率是批处理色谱的5.48倍,而批处理的溶剂消耗是CBC的1.27倍,并且在产品纯度、回收率上CBC也要明显优于批处理色谱。显而易见,与批处理色谱比较,CBC的制备优势突出。而与其他连续色谱相比,例如:模拟移动床色谱(SMB),CBC系统的优势主要体现在进样条件优越、操作条件容易获得、系统灵活多变,能够减少摸索条件过程中样品与溶剂的浪费,能够广泛应用到各类混合物的制备纯化中。本文的研究结果表明,用连续批处理色谱分离鱼油乙酯中EPA-EE是可行且有效的。本文的结果及所用方法对其他天然活性成分的分离提纯具有借鉴作用。