论文部分内容阅读
聚集诱导发光(AIE)分子是一类在单分子状态下荧光微弱甚至观察不到荧光，而在聚集状态下荧光显著增强的化合物，这类荧光分子避免了传统荧光生色团在聚集后会导致荧光猝灭的缺点。AIE分子的这一特性，在用于生物或者化学检测时可将检测限降到更低。本文对两种不同的AIE分子硅杂环戊二烯衍生物A2HPS和四苯基乙烯的衍生物TPE的荧光性质做了研究，探讨了这两种分子与不同蛋白之间的相互作用，建立了特异性识别蛋白的荧光检测方法。本论文工作包括三个部分。
第一部分，研究了pH对A2HPS荧光发射的影响，pH2.0和pH4.0条件下不同蛋白对A2HPS荧光发光的响应；MP、PNP对A2HPS的猝灭效应；A2HPS对MPH动力学影响；pH8.0条件下MP猝灭A2HPS鉴别MPH。实验结果表明：pH低于5.0时，A2HPS荧光发光很弱，当pH在5.0到7.0之间时A2HPS荧光强度随着pH值的加大而增强，当pH大于8.0时荧光强度达到最大并保持稳定；MP对PNP都会使A2HPS猝灭，且MP的猝灭效力要高于PNP；A2HPS对MPH的催化反应有一定的抑制效果；当pH8.0时，A2HPS-MP复合荧光探针能够在多种蛋白中特异性识别MPH，并且在同等条件下比紫外检测蛋白的方法更加灵敏。
第二部分，研究了pH、不同溶剂对水溶性TPE-2SO3Na+荧光发射的影响；TPE-2SO3Na+浓度与荧光强度关系；MP、PNP对TPE-2SO3Na+猝灭效应；TPE-2SO3Na+与多种蛋白的相互作用。实验结果表明：溶液pH、不同溶剂均对TPE的荧光有一定影响，在中性Tris缓冲液中自身荧光背景较低；MP、PNP都会使TPE-2SO3Na+猝灭，不同于A2HPS，PNP对TPE-2SO3Na+的猝灭效果要高于MP；TPE-2SO3Na+对不同蛋白的荧光响应是不同的，对一些蛋白的荧光响应会随着蛋白浓度增大而逐渐增强，而对另一些蛋白在蛋白浓度较低时荧光发光增强，而在蛋白浓度较高时，荧光发光反而随着蛋白浓度的增大而减弱。
第三部分，研究构建复合荧光探针TPE-BSA，为筛选、比较胰蛋白酶抑制剂抑制效果建立荧光方法摸索条件：TPE-BSA的浓度配比，TPE-BSA探针的最适溶剂，用新构建的TPE-BSA检测胰蛋白酶抑制剂的抑制效果。实验结果表明：利用新构建的TPE-BSA探针能够检测抑制剂抑制效果。
第一部分，研究了pH对A2HPS荧光发射的影响，pH2.0和pH4.0条件下不同蛋白对A2HPS荧光发光的响应；MP、PNP对A2HPS的猝灭效应；A2HPS对MPH动力学影响；pH8.0条件下MP猝灭A2HPS鉴别MPH。实验结果表明：pH低于5.0时，A2HPS荧光发光很弱，当pH在5.0到7.0之间时A2HPS荧光强度随着pH值的加大而增强，当pH大于8.0时荧光强度达到最大并保持稳定；MP对PNP都会使A2HPS猝灭，且MP的猝灭效力要高于PNP；A2HPS对MPH的催化反应有一定的抑制效果；当pH8.0时，A2HPS-MP复合荧光探针能够在多种蛋白中特异性识别MPH，并且在同等条件下比紫外检测蛋白的方法更加灵敏。
第二部分，研究了pH、不同溶剂对水溶性TPE-2SO3Na+荧光发射的影响；TPE-2SO3Na+浓度与荧光强度关系；MP、PNP对TPE-2SO3Na+猝灭效应；TPE-2SO3Na+与多种蛋白的相互作用。实验结果表明：溶液pH、不同溶剂均对TPE的荧光有一定影响，在中性Tris缓冲液中自身荧光背景较低；MP、PNP都会使TPE-2SO3Na+猝灭，不同于A2HPS，PNP对TPE-2SO3Na+的猝灭效果要高于MP；TPE-2SO3Na+对不同蛋白的荧光响应是不同的，对一些蛋白的荧光响应会随着蛋白浓度增大而逐渐增强，而对另一些蛋白在蛋白浓度较低时荧光发光增强，而在蛋白浓度较高时，荧光发光反而随着蛋白浓度的增大而减弱。
第三部分，研究构建复合荧光探针TPE-BSA，为筛选、比较胰蛋白酶抑制剂抑制效果建立荧光方法摸索条件：TPE-BSA的浓度配比，TPE-BSA探针的最适溶剂，用新构建的TPE-BSA检测胰蛋白酶抑制剂的抑制效果。实验结果表明：利用新构建的TPE-BSA探针能够检测抑制剂抑制效果。