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目的:观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)屏障通透性的损伤及普通肝素(UFH)的保护作用,探讨UFH对HMGB1介导的血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)表达下调的保护机制。研究方法:体外培养HUVEC并传代,待细胞融合生长至80%时随机分为4组:磷酸盐缓冲液(PBS)对照组(200μL PBS)、重组人高迁移率族蛋白B1(rhHMGB1)处理组(100μg/L rhHMGB1)、UFH对照组(10kU/L UFH)、UFH预处理组(10 kU/L UFH+100μg/L rhHMGB1)。各组细胞经不同处理24 h后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定内皮细胞活性,采用Transwell法测定内皮细胞通透性,采用免疫荧光法观察VE-cadherin的表达及分布,采用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)测定VE-cadherin及磷酸化p38丝裂素活化蛋白激酶(p-p38MAPK)的蛋白表达。结果:经100μg/L的rhHMGB1处理24 h后,内皮细胞活性与PBS对照组差异无统计学意义(A值:0.230±0.004比0.255±0.006,P>0.05),但内皮细胞通透性显著升高(葡聚糖FD40荧光强度:11.05±0.12比6.34±0.39,P<0.05);与PBS对照组比较,荧光显微镜下显示rhHMGB1处理组VE-cadherin膜定位减少,分布松散,细胞间出现明显裂隙,定量分析显示VE-cadherin蛋白表达明显下降(VE-cadherin/β-actin:0.16±0.04比0.31±0.03,P<0.05),p-p38MAPK蛋白表达明显升高(p-p38MAPK/β-actin:0.79±0.03比0.26±0.05,P<0.05)。UFH预处理可对HMGB1介导的内皮细胞损伤起保护作用,表现为细胞通透性明显降低(葡聚糖FD40荧光强度:9.11±0.23比11.05±0.12),VE-cadherin荧光表达明显增强,膜定位明显增加,定量分析显示VE-cadherin的蛋白表达明显上调(VE-cadherin/β-actin:0.24±0.02比0.16±0.04),且p38MAPK的磷酸化水平明显降低(p-p38MAPK/β-actin:0.54±0.05比0.79±0.03),与rhHMGB1处理组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。PBS对照组与UFH对照组各项指标比较差异均无统计学意义。结论:UFH可保护HMGB1所致的VE-cadherin表达减少和分布异常,进而保护内皮细胞屏障通透性,其作用机制与UFH抑制p38MAPK的磷酸化相关。