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羊口疮作为一种人畜共患传染病,其典型的特征就是引起口唇部皮肤组织严重的病理损伤。羊口疮的致病病毒为羊口疮病毒,羊口疮病毒在患病动物的皮肤中定殖并增殖,并在表皮细胞中复制,引发严重的炎症反应。之前的研究发现IL-17作用于上皮细胞,诱导各种炎性细胞因子的分泌,募集、活化中性粒细胞促使其迁移至炎症部位。且已有研究发现IL-17在皮肤炎症疾病中高表达,导致中性粒细胞浸润甚至是严重的病理组织损伤。因此我们猜测羊口疮的炎症反应可能与IL-17的致炎作用有关。综上本试验将IL-17与羊口疮引起的病理组织损伤联系起来,阐明羊口疮的免疫病理损伤的发生机制。本研究采用PCR和免疫荧光染色技术对羊口疮及其致病病毒进行检测,确定患病山羊患有羊口疮;以羊口疮患病山羊为试验动物,采用病理组织切片染色和血细胞计数技术,研究病灶组织部位的炎性细胞浸润情况;再与炎性细胞因子IL-17和中性粒细胞联系起来,分别采用免疫荧光染色和real-time PCR技术,研究IL-17和中性粒细胞趋化因子等细胞因子的变化规律,探讨IL-17与中性粒细胞在炎症过程中扮演的角色和羊口疮免疫病理损伤的发生机制。研究取得如下结果:1、患病山羊产生典型的羊口疮临床症状与病理变化,病变组织的病毒PCR检测呈阳性,免疫荧光染色确定羊口疮病毒感染山羊并积累在山羊口唇部皮肤,统计学分析显示病灶部位羊口疮病毒的蛋白水平表达量显著高于正常个体(P<0.001);2、羊口疮病毒感染山羊后,口唇部组织中中性粒细胞趋化因子CCL4,CXCL6和IL-8及粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的m RNA水平表达量显著升高(P<0.05),口唇部组织和血液内中性粒细胞的数目显著增加(P<0.05),病灶组织部位病理损伤程度与炎症程度也均显著高于正常个体(P<0.01);3、羊口疮病毒感染山羊后,口唇部组织和外周血单个核细胞中IL-17及其相关细胞因子IL-23p19、IL-6、IL-1β的m RNA水平表达量显著升高(P<0.01),统计学分析显示病灶部位IL-17的蛋白水平表达量显著高于正常个体(P<0.001);4、羊口疮病毒感染山羊后,病变组织免疫荧光染色结果显示IL-17和CD4,IL-17和γδT表达位置几乎重叠,统计学分析显示病灶部位重叠部位的蛋白水平表达量均显著高于正常个体(P<0.01);5、羊口疮病毒直接刺激外周血单个核细胞,IL-17、IL-23p19、IL-6、IL-1β的m RNA水平表达量均显著提高(P<0.05);6、IL-17直接刺激山羊口唇上皮细胞,中性粒细胞趋化因子IL-8、CXCL6、CCL4的m RNA水平表达量均显著提高(P<0.05)。结论:1、羊口疮病毒的入侵造成IL-17的显著升高,IL-17被募集到病灶组织部位,IL-17主要介导炎症反应;2、大量IL-17的刺激导致了中性粒细胞数量的显著升高,IL-17招募大量中性粒细胞至病变部位;3、病灶部位募集了大量中性粒细胞,中性粒细胞浸润引起炎症反应过度,进而引发严重的病理组织损伤。