【摘 要】
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玉竹是百合科植物玉竹Polygonatum odoratum（Mill.）Druce的干燥根茎,为药食同源物质,具有养阴润燥、生津止渴功效,广泛用于药品、保健食品、化妆品等行业。玉竹资源辽阔,因生境不同使其成分有别,导致疗效差异。现代药学研究显示,玉竹中的四种高异黄烷酮（Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ）,在抗癌、抑菌、抗氧化及对蛋白质非酶糖基化等方面具有较强生物活性,但2015年版《中国药典》一部,在玉竹活性成分
【基金项目】
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黑龙江省自然科学基金（批准号:LH2019H127）；
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玉竹是百合科植物玉竹Polygonatum odoratum（Mill.）Druce的干燥根茎,为药食同源物质,具有养阴润燥、生津止渴功效,广泛用于药品、保健食品、化妆品等行业。玉竹资源辽阔,因生境不同使其成分有别,导致疗效差异。现代药学研究显示,玉竹中的四种高异黄烷酮（Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ）,在抗癌、抑菌、抗氧化及对蛋白质非酶糖基化等方面具有较强生物活性,但2015年版《中国药典》一部,在玉竹活性成分检测方面,仅收录“多糖总量≥6.0%”、“醇提物总量≥50.0%”,不能全面反映其质量。基于上述情况,本文首次系统性地建立了玉竹中四种高异黄烷酮（Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ）的定性、定量分析方法及玉竹醇提物的指纹图谱。主要内容与创新点:1.基于二次层析HPTLC,研究与建立了玉竹中四种高异黄烷酮的鉴别方法,并用于20批玉竹样品的比较与分析。2.率先基于TLC分离,对玉竹中两种高异黄烷酮（Ⅲ、Ⅳ）主斑点进行原位拉曼光谱研究,并应用于3批玉竹样品的鉴别;首次建立了趋向中心的TLC主斑点原位富集方法,有效提高了TLC待测成分浓度,为提高拉曼光谱原位检测的灵敏度提供一种新方法。3.建立了33批玉竹醇提物UPLC指纹图谱,标定了13个共有峰,并指认其中4个共有峰为四种高异黄烷酮（Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ）,33批玉竹相似度在0.90以上的19批,采用主成分分析（PCA）、偏最小二乘法判别分析（PLS-DA）及独立样本t检验结合各变量的VIP值正态分布分析,将不同产地玉竹分为5组,发现6个主要差异成分,包括三种高异黄烷酮（Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ）成分。4.采用Agilent Acquity超高效液相系统,Kromasil C18（100 mm×2.1 mm,1.8μm）色谱柱,以0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相,梯度洗脱,检测波长297nm。首次建立了UPLC同时测定玉竹中四种高异黄烷酮含量的分析方法,包括内标法、一测多评法、外标法。3种定量方法经方法学验证表明,内标法与一测多评法相近并符合《中国药典》对中药定量分析要求,其中内标法用于33批玉竹检测结果显示,Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ的平均含量分别为5.754μg/g、35.60μg/g、27.48μg/g、15.74μg/g,总含量为84.58μg/g。同一成分在各产地玉竹中的含量差异明显,其中低于LOD、LOQ、线性范围下限的12批,高于线性范围上限的3批。
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