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目的1.观测不同分割剂量照射对三阴性乳腺癌细胞的放射生物学效应差异及对三阴性乳腺癌小鼠移植瘤增殖效应的影响。2.探讨大分割和常规分割照射对乳腺癌移植瘤小鼠免疫功能的影响。材料与方法1.细胞实验以三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231为研究对象,应用医用直线加速器以6MeV电子线照射0Gy、2Gy、4Gy、8Gy、10Gy,应用流式细胞仪检测不同照射剂量对乳腺癌细胞周期及凋亡的影响情况,以克隆形成实验检测不同剂量对乳腺癌细胞增殖抑制情况差异。在细胞实验的基础上以三阴性乳腺癌MDA-MB-231移植瘤裸鼠为研究对象,以不同分割方式照射三阴性乳腺癌MDA-MB-231移植瘤,观测记录比较移植瘤生长曲线差异;以免疫组化于照射后7天、14天检测Ki-67表达情况的差异;以Siemens Inveon PET/CT于放射治疗后7天、14天监测移植瘤增殖活性的差异。2.以4T1鼠源性乳腺移植瘤小鼠为研究对象,分别给予20Gy、2Gy及0Gy照射。应用游标卡尺记录受照后移植瘤长短径,绘制生长曲线;实验组分别于照射后4天、10天取血及瘤体,应用流式细胞仪检测其CD4+T细胞、CD8+T细胞比例。结果1.随着照射剂量的增高,三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞周期G2/M期阻滞、细胞凋亡越明显;增殖活性抑制逐渐增强,尤其在4Gy以上,抑制效果尤为明显。动物实验中,在同等剂量条件下采取不同分割照射方式,单次大剂量照射相较于常规分割照射对于移植瘤的抑制作用更为明显,对于细胞增殖活性的抑制更强,持续的时间也更长;对肿瘤细胞内Ki-67的表达抑制程度更强,肿瘤细胞代谢活性的抑制效果也更好。2.大剂量20Gy对于肿瘤生长抑制效果明显好于常规分割剂量2Gy;瘤体内,在放疗结束后4、10天,20Gy组CD4+T细胞、CD8+T细胞比例呈现升高,2Gy组与对照组差异不明显;外周血中,照射组在放疗后4天,CD8+T细胞比例均下降,低于未照射组,CD4+T细胞比例升高,高于未照射组;放疗后10天,外周血中,照射组与未照射组CD4+T细胞、CD8+T细胞比例差异不明显。结论1.随着剂量增高,射线对于三阴性乳腺癌MDA-MB-231杀伤作用增强,同时分割剂量达到4Gy及以上时,放射线才有可能对射线耐受性比较好MDA-MB-231细胞达到较好的杀伤效果。不同分割剂量条件下,单次大剂量放疗相对于同等物理剂量条件下常规分割剂量放疗,在活体内抑制肿瘤细胞的增殖能力的效果更好。2.大剂量照射后早期,由于即效杀伤作用,致使肿瘤区CD4+T细胞、CD8+T细胞比例下降,受照后10天,瘤区才有可能出现有大剂量照射引起的抗肿瘤免疫反应,而常规分割剂量可能在刺激机体产生抗肿瘤免疫方面作用较弱。