目的：系统研究小秦艽花的化学活性成分；建立小秦艽花的含量测定方法，为该蒙药的定量指控提供实验依据。 方法：利用现代色谱技术和分离方法(硅胶柱层析、大孔吸附树脂柱层析、聚酰氨柱层析、凝胶柱层析、制备性薄层色谱)对小秦艽花(FlosGentianae dahuricae)醇提物进行分离；采用高效液相色谱法(HPLC)测定小秦艽花中异荭草苷的含量。 结果：分离得到11个化合物，利用现代波谱学技术(ESI-MS、1HNMR、13CNMR)鉴定出7个化合物：5-羟基水杨酸(5-OH-salicylicacid)(G1)，芹菜素(apigenin)(G2)，α-D-葡萄糖苷基-α-D-葡萄糖苷(G3)，异荭草苷(isoorientin)(G4)，异牡荆苷(isovitexin)(G5)槲皮素(quercetin)(G6)，龙胆苦苷(gentiopicroside)(G7)。 结论：七个化合物均为首次从该药材中分离得到。建立了小秦艽花中异荭草苷含量的HPLC测定方法，该方法快速准确、重复性好，可作为蒙药材小秦艽花质量控制。