真菌毒素是由一些生长在谷物、干果、无花果、水果中的真菌产生的一类毒性化合物。和黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮一样,赭曲霉毒素A主要存在于谷物类作物及其制品、水果及其制品等食品中,是世界范围内污染较广、毒性较强的真菌类毒素之一,严重威胁人类的食品安全。然而,目前的检测方法大多需要专门的仪器设备,已无法满足现场快速检测的要求。因此,研究和建立一种方便、安全和快速的赭曲霉毒素A检测方法意义深远。本实验采用活性酯法将赭曲霉素A(OTA)分别与载体牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联制成人工抗原。以偶联抗原OTA-BSA免疫BALB/c小鼠,小鼠脾细胞与SP2/0细胞进行融合,获得杂交瘤细胞。以偶联抗原OTA-OVA作为包被抗原,用ELISA方法对杂交瘤细胞进行筛选,有限稀释法对杂交瘤细胞做亚克隆,获得1株能稳定分泌抗OTA单克隆抗体的杂交瘤细胞株3812。以间接ELISA方法测定腹水单抗效价为1：204800,3812单抗OTA的半数抑制浓度(IC50)为20ng/mL,与OTB、OTC、香豆素等结构类似物基本没有交叉反应；采用柠檬酸三钠还原法制备直径25nm的胶体金并标记抗OTA单克隆抗体作为检测试剂,单抗加入量为18μg/mL,标记pH控制在8.5左右,以1%BSA作稳定剂。试剂盒的检测灵敏度为5ng/mL。实验研制的赭曲霉毒素A胶体金免疫层析试剂盒最大的优点是检测快速、特异、灵敏、简便,5～10min内可出检测结果,适用于对OTA残留进行现场检测。