【摘 要】
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柠檬黄蜡伞(Hygrophorus lucorum Kalchbr)是隶属担子菌亚门、伞菌目、蜡伞科的一种美味的食用和药用真菌。文献报道柠檬黄蜡伞多糖具有抗肿瘤等多种生物活性。目前关于柠檬
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柠檬黄蜡伞(Hygrophorus lucorum Kalchbr)是隶属担子菌亚门、伞菌目、蜡伞科的一种美味的食用和药用真菌。文献报道柠檬黄蜡伞多糖具有抗肿瘤等多种生物活性。目前关于柠檬黄蜡伞多糖的研究主要集中在水溶性多糖的提取工艺的优化和生物活性方面,但是尚未发现有关柠檬黄蜡伞多糖的系统分级以及结构分析方面的报道。本论文研究了柠檬黄蜡伞中多糖的组成和精细结构的解析,为深入研究柠檬黄蜡伞多糖结构和活性之间的关系以及多糖保健品和医疗药物的开发应用提供了理论基础。研究成果如下:本论文采用热水煮提、乙醇醇沉法得到柠檬黄蜡伞多糖WHLP,得率为7.1%(相对于原料干重)。对柠檬黄蜡伞多糖理化性质分析结果表明,WHLP多糖的糖含量为67.3%,蛋白质含量为5.0%,盐分含量为6.8%,未检测到糖醛酸和核酸。对柠檬黄蜡伞多糖进行单糖组成分析,结果表明WHLP主要由Glc(48.6%)和Gal(20.7%)组成,此外还含有Man(15.0%)和Fuc(8.1%),以及少量Ara(3.3%)和GlcA(2.5%)。采用DEAE-纤维素离子交换层析对WHLP进行电荷分级,得到蒸馏水洗脱的中性糖级分WHLP-N和0.35 M NaCl溶液洗脱的电荷均一的酸性糖级分WHLP-A。然后对WHLP-N和WHLP-A利用凝胶柱层析按照分子量分级,选用SepharoseCL-6B凝胶层析柱对两种级分进行分离纯化,得到2个主要的均一级分:WHLP-N-b和WHLP-A-b。对两种均一级分WHLP-N、WHLP-A结构解析,经分子量及均一性测定、单糖组成分析、红外光谱分析、甲基化分析以及核磁共振分析等分析方法,结果表明WHLP-N-b分子量为12 kDa,结构是以α-D-1,6-Galp为主链,在部分Gal的C-2位发生取代形成支链,侧链由t-β-D-Manp和t-α-L-Fucp结构构成的岩藻甘露半乳聚糖。WHLP-A-b分子量为3 kDa,结构是以β-D-1,6-Glcp为主链,在部分Glc的O-3位发生取代形成侧链,侧链结构主要由α-D-1,4-Manp构成,以及少量β-D-1,3-Glcp、α-D-1,2,6-Galp,和部分t-β-D-Glcp的甘露半乳葡聚糖。本文对柠檬黄蜡伞多糖的系统分离纯化及对其均一级分结构的研究,丰富了真菌多糖的结构信息,为探究多糖结构和活性之间的关系奠定了基础,同时也为多糖药物的开放提供了理论基础。
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