藏橐吾地上部分化学成分及其活性研究

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藏橐吾(Ligulari rumicifolia)是我国西藏地区特有的植物资源,同时对家畜健康存在潜在危害。目前,国内外对于藏橐吾的研究主要有营养成分分析和生物碱GC-MS分析两个方面,对于系统分析其所含化学成分及其活性尚属空白。本研究对采自西藏地区的藏橐吾地上部分进行化学成分研究,并且对其所含物质进行抗菌活性以及细胞毒性研究。初步研究藏橐吾地上部分所含化合物成分及其主要毒性成分,丰富橐吾属植物化合物组成,为进一步研究其中毒机制奠定基础。同时,为藏橐吾的开发利用和综合防控提供理论依据。研究结果如下:1.化学成分系统研究:采用常规柱层析、薄层色谱法等技术对其石油醚部位进行分离,并采用NMR和GC-MS等光谱技术进行确定。初步鉴定5种化合物,其中(3S,10R,13S,17R)-17-((2S)-5-ethyl-3-hydroxy-6-methylheptan-2-yl)-10,13-dimethyl-2,3,4,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-tetradecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-ol、(10R,13R)-17-((E)-5-ethyl-6-methylhept-3-en-2-yl)-10,13-dimethyl-2,3,4,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-tetr adecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-ol、(3S,10R,13R,17R)-17-((2S)-5-ethyl-3-hydro xy-6-methylheptan-2-yl)-10,13-dimethyl-2,3,4,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-tetradecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthrene-3,7-diol和17-(5,6-dimethylhept-6-en-2-yl)-10,13-dimethyl-2,3,4,7,8,9,10,13,14,15,16,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-ol为甾醇类化合物,(1R,8S,8a R)-8,8a-dimethyl-6-oxo-2-(propan-2-ylidene)-1,2,3,4,6,7,8,8a-octahydronapht halen-1-yl(E)-2-methylbut-2-enoate为倍半萜类化合物。2.PE 1部位GC-MS分析:对藏橐吾石油醚部位进行柱层析,石油醚洗脱,收集小极性部位(PE 1)进行GC-MS分析,共鉴定出55种化合物,主要化合物类型:酯类(23.86%)、烷烃(23.76%)、烯烃(3.65%)和倍半萜(2.88%);主要成分:二十五烷(16.89%)、乙酸金合欢酯(8.32%)和(24R,25S)-甾醇乙酸酯(7.82%)。3.生物碱成分专项分离:采用生物碱系统提取法,从20 kg藏橐吾地上部分得到碱性二氯甲烷部分9 g、碱性正丁醇部分83.33 g。分别占藏橐吾地上部分的0.045%和0.417%。采用薄层色谱、柱色谱等分离方法,结合NMR等鉴定方法,从碱性二氯甲烷部位分离得到2种化合物,其中千里光碱为生物碱类化合物,(E)-3-(3-hydroxy-4-methoxy phenyl)-1-(2-hydroxy-5-methylphenyl)prop-2-en-1-one为黄酮类化合物。4.生物活性检测:采用MTT法检测PE 1部位对奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌抑菌效果,结果显示:藏橐吾小极性部位MIC50为1.724 mg/m L,95%置信区间为1.072-2.827 mg/m L,初步表明PE 1具有良好的抗菌活性。此外,对于藏橐吾地上部分各萃取部位及化合物细胞毒性检测发现:各萃取部位细胞毒性强弱依次为碱性二氯甲烷部位>石油醚部位>碱性正丁醇部位>二氯甲烷部位>正丁醇部位;对各化合物毒性强弱进行比较,化合物2和化合物6对BRL-3A细胞生长抑制作用最强。初步阐明藏橐吾主要活性部位为碱性二氯甲烷部位和石油醚部位。
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