背景和目的：骨肉瘤(osteosarcoma，OS)，又称成骨肉瘤，起源于间叶组织，是最常见的原发性恶性骨肿瘤，在儿童和青少年中多见。因其较早发生的转移和易于产生耐药性，所以疗效不尽人如意。目前骨肉瘤患者的五年生存率仍旧较低：非转移患者65%-70%，转移患者10%-20%。因此，寻找一种新的诊断标志物和治疗靶标，对骨肉瘤患者尤其是已转移患者的早期诊断和有效治疗有着重要意义。微小RNA(miRNA)是非编码RNA的一种，miRNA调控基因表达的方式是通过结合靶基因的3’-非翻译区(3’-UTR)结合，降解其mRNA或抑制其翻译。大量的研究表明，miRNA参与细胞生命活动的各个阶段，包括细胞增殖、细胞迁移、细胞侵袭、细胞凋亡等。近年来研究显示miRNA的表达失调在肿瘤的发生、发展中扮演着重要作用。TRIAP1，也称P53CSV，当细胞处于轻度应激时，p53可诱导其产生。研究表明，TRIAP1与多种肿瘤的发生有关。目前miRNA和TRIAP1之间的一些联系也已被发现。但是miRNA和TRIAP1的相互作用在骨肉瘤中的作用尚未有相关研究。
　　本实验选取miRNA-539作为研究对象，将miRNA-539转入骨肉瘤细胞143b和MG-63中，观察其在体外对骨肉瘤细胞的增殖，凋亡，迁移，侵袭等的影响，通过构建裸鼠骨肉瘤原位移植模型，观察miR-539在体内对骨肉瘤生长速度的影响。
　　方法：首先通过实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)检测骨肉瘤143b和MG-63细胞和正常人成骨细胞hFOB1.19中miRNA-539的相对表达量。接下来使用LipofectamineTM2000转染miRNA-539mimic或Negativecontrol(NC),并用qRT-PCR方法检测转染效率。CCK-8法检测miRNA-539对骨肉瘤细胞143b和MG-63增殖的影响。流式细胞术检测miRNA-539对骨肉瘤细胞143b和MG-63凋亡的影响。细胞划痕实验和Transwell实验检测其对骨肉瘤细胞迁移和侵袭的影响。通过生物信息预测在线工具发现TRIAP1为miRNA-539的潜在靶基因，并发现TRIAP1mRNA的3’非翻译区(3’-UTR)有miRNA-539的结合位点。利用qRT-PCR方法检测过表达miRNA-539骨肉瘤细胞中TRIAP1的相对表达量。构建裸鼠原位移植骨肉瘤模型观察miRNA-539对裸鼠骨肉瘤生长速度的影响。
　　结果：
　　1.骨肉瘤细胞143b和MG-63中miRNA-539的相对表达量明显低于成骨细胞hFOB1.19(p＜0.05)。
　　2.过表达miRNA-539后，骨肉瘤细胞143b和MG-63的增殖水平，迁移能力，侵袭能力明显低于对照组，凋亡水平明显高于对照组，差异均具有统计学意义(p＜0.01)。
　　3.过表达miRNA-539骨肉瘤细胞中TRIAP1的相对表达量明显低于对照组，差异有统计学意义(p＜0.01)。
　　4.实验组miRNA-539的骨肉瘤生长速度明显弱于对照组，差异有统计学意义(p＜0.01)。
　　结论：
　　miRNA-539在骨肉瘤细胞143b和MG-63中表达下降；且miRNA-539能调控TRIAP1而抑制骨肉瘤细胞的增殖、迁移、侵袭能力，并促进骨肉瘤细胞的凋亡。