论文部分内容阅读
目的:采用流式细胞术检测急性白血病患儿及正常对照组儿童外周血中NK细胞表面受体NKG2D、Nkp46及KIR2DL1在不同化疗阶段的表达率和NK细胞杀伤活性,及分析NK细胞表面受体与NK细胞杀伤活性的相关性,探讨急性白血病患儿NK细胞免疫重建情况,以期建立儿童白血病NK细胞免疫治疗的基础。方法:62例急性白血病患儿,其中包括50例急性淋巴细胞白血病(ALL)和12例急性粒细胞白血病(AML),依据化疗不同阶段分为新发组(初发未经治疗)16例、缓解组46例,包括完全缓解6-9月组(CR-A组)16例、完全缓解12-18月组(CR-B组)14例、完全缓解24月后组(CR-C组)16例;以8或15例健康正常儿童为正常对照。采用流式细胞术分别检测外周血NK细胞表面NKG2D、NKp46及KIR2DL1表达率,以及外周血单个核细胞CD107a标记的NK细胞活性。采用SPSS17.0统计软件进行数据处理,两组独立样本检验采用t检验、Wilcoson秩和检验,多组定量资料间采用单因素方差分析进行统计学检验,两组间可采用LSD-t检验方法进行统计学检验,采用Pearson积矩相关进行相关性分析。结果:1.新发组、CR-A组、CR-B组、CR-C组患儿及正常对照组儿童外周血NK细胞表面NKG2D的表达率分别为(79.64±11.40)%、(86.32±6.85)%、(86.90±3.54)%、(87.10±5.78)%,(92.33±2.78)%,各组间总体差异无统计学意义(F=1.169,p>0.05);除新发组NKG2D表达率显著低于正常对照组外(p<0.05),其他两两比较各组间无统计学差异(p均>0.05)。新发组、CR-A组、CR-B组、CR-C组患儿及正常对照组儿童NK细胞表面Nkp46的表达率分别为(61.51±11.31)%、(77.85±5.98)%、(77.17±9.80)%、(82.43±6.02)%、(85.76±6.40)%,组间总体差异具有显著统计学意义(F=4.474,p<0.05);新发组表达率低于CR-A组、CR-B组、CR-C组、正常对照组,差异具有统计学意义(p<0.05); CR-A组、CR-B组、CR-C组及正常对照组两两比较,差异无统计学意义(p>0.05);缓解组与正常对照组间表达率差异无统计学意义((79.24±4.15)%VS (85.76±6.40)%, p>0.05)。新发组、CR-A组、CR-B组、CR-C组患儿及正常对照组儿童外周血NK细胞表面KIR2DL1的表达率分别为(19.89±3.52)%、(10.22±1.61)%、(10.37±1.62)%、(17.73±3.63)%、(29.12±3.98)%,各组间总体差异具有显著统计学意义(F=20.307,p<0.001);新发组高于CR-A组、CR-B组,低于正常对照组,差异均具有显著统计学意义(p均<0.001),与CR-C组间表达率差异无统计学意义(p>0.05);缓解组表达率均低于正常对照,差异有显著统计学意义(p均<0.001);CR-A组、CR-B组表达率差异无统计学意义(p>0.05),二者均低于CR-C组(p<0.001)。2.相关性分析:62例白血病患儿、39例缓解期ALL患儿NK细胞杀伤活性与NK细胞数量、NK细胞表面KIR2DL1、NKp46表达率间均呈正相关(p均<0.05),而与NKG2D表达率无相关性(p均>0.05)。16例新发组白血病患儿NK细胞杀伤活性与NKp46表达率呈正相关(r=0.530,p<0.05),与KIR2DL1表达率呈负相关(r=-0.574,p<0.05),而与NK细胞数量、NKG2D表达率无相关性(p均>0.05)。3.新发ALL与AML患儿NK细胞表面NKG2D、NKp46、KIR2DL1表达率差异总体分布均不同(p<0.05)结论:1、新发急性白血病患儿外周血NK细胞表面受体NKp46、NKG2D、KIR2DL1表达率均低于正常对照组。2.急性白血病患儿NK细胞表面NKp46、NKG2D表达率于完全缓解6-9月即恢复至基本正常,KIR2DL1表达率于完全缓解后6-18月低于初诊治疗前,24个月后升高,但仍未恢复至正常水平。3.急性白血病患儿NK细胞活性低于正常。4.急性淋巴细胞性白血病完全缓解后,患儿NK细胞杀伤活性与NK细胞数量呈正相关,与NK细胞表面NKp46、KIR2DL1表达率呈正相关,而与NKG2D表达率无相关性。