【摘 要】
：
研究背景和目的:炎症性骨溶解发生的主要原因是炎性细胞因子的产生如IL-1β、IL-6和TNFα等。这些炎性因子可以刺激破骨细胞的募集和激活,致使它的骨吸收功能增强,从而引发骨代谢平衡紊乱。破骨细胞作为唯一可以发挥骨基质吸收功能的细胞,在炎症性骨溶解的发生机理中极其重要。深入认识破骨细胞吸收骨骼的机制以及调节其分化和活性的细胞因子可提供基于机制或细胞因子的潜在治疗靶点,以预防炎症性骨丢失。尽管目前的
论文部分内容阅读
研究背景和目的:炎症性骨溶解发生的主要原因是炎性细胞因子的产生如IL-1β、IL-6和TNFα等。这些炎性因子可以刺激破骨细胞的募集和激活,致使它的骨吸收功能增强,从而引发骨代谢平衡紊乱。破骨细胞作为唯一可以发挥骨基质吸收功能的细胞,在炎症性骨溶解的发生机理中极其重要。深入认识破骨细胞吸收骨骼的机制以及调节其分化和活性的细胞因子可提供基于机制或细胞因子的潜在治疗靶点,以预防炎症性骨丢失。尽管目前的治疗剂对破骨细胞介导的骨质流失有效,但存在的副作用风险使这些药物无法长期使用。PI3K-AKT信号通路在破骨细胞的分化过程中发挥着关键的作用。Leniolisib（CDZ173）是高效选择性的PI3Kδ小分子抑制剂,本课题研究了CDZ173对破骨细胞的分化和功能抑制作用以及缓解LPS诱导的部分骨溶解作用,并进一步探索其分子机制。方法:（1）体外实验:首先从C57BL/6J小鼠的股骨和胫骨提取骨髓源巨噬细胞（bone marrow derive macrophages,BMMs）,然后采用CCK-8试剂盒检测CDZ173对30 ng/m L M-CSF刺激BMMs的增殖作用。进一步采用TRAP染色观察CDZ173对破骨细胞分化的影响。其次,设计肌动蛋白骨架荧光实验和羟基磷灰石细胞板骨吸收实验用于检测CDZ173对破骨细胞吸收骨基质功能的影响。同时运用RT-PCR实验检测不同浓度的CDZ173对破骨细胞相关特异性基因表达的影响。此外,采用Western blotting实验检测CDZ173对破骨细胞相关信号通路PI3K-AKT、NF-κB及MAPK的影响。最后,ALP和ARS染色用于观察CDZ173对成骨细胞分化和矿化的影响。（2）体内实验:LPS小鼠骨溶解模型的构建:采用随机抽样的方法把6-8周龄雄性的C57BL/6J小鼠分为4组（Sham组,LPS组,CDZ173（2.5mg/kg）+LPS组和CDZ173（5 mg/kg）+LPS组）。实验结束后获取小鼠颅盖骨以进行Micro-CT分析。结果:（1）体外实验:（1）在本研究课题,我们首先在细胞实验发现CDZ173在安全剂量范围内有效抑制破骨细胞的形成。（2）通过骨吸收实验发现CDZ173抑制破骨细胞肌动蛋白带的融合,并减小破骨细胞吸收羟基磷灰石板的面积。（3）通过RT-PCR实验,我们在基因层面上观察到CDZ173可以降低破骨细胞的Dc-stamp、Ctsk、Mmp-9、Trap、c-Fos和NFATc1基因表达。（4）在分子机制层面进一步发现CDZ173抑制PI3K-Akt、ERK和JNK信号通路的活化,并且抑制下游转录因子蛋白c-Fos和NFATc1的表达。（5）通过ALP和ARS染色观察到CDZ173对成骨细胞的形成和矿化无影响。（2）体内实验:经Micro-CT扫描结果分析发现LPS组相对于Sham组颅盖骨的骨量明显缺失,且具有显著统计学意义;而经5 mg/kg CDZ173处理后得到明显改善。结论:CDZ173通过抑制RANKL刺激的PI3K-Akt、ERK和JNK信号通路活化来下调破骨细胞相关基因表达,进而抑制破骨细胞分化和功能,从而缓解LPS诱导局部骨溶解的进展。
其他文献
研究背景:卵巢癌是女性生殖系统常见的三大恶性肿瘤之一,具有高致死率和发病率以及低生存率的特点,严重威胁女性生命健康。由于卵巢癌早期发病隐匿,通常于晚期被确诊,目前治疗卵巢癌的主要手段主要依靠手术切除病灶并术后给予化疗药物治疗。卡铂是临床上常用于治疗卵巢癌的一种化疗药物,随着化疗时间延长,卵巢癌患者容易产生耐药性,影响卡铂化疗效果而导致不良预后。因此,研究卵巢癌耐药机制并寻找调控耐药的关键因子是临床
背景:社会人口老龄化的加剧使得老年人高发的脑神经退行性疾病如阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）、帕金森病（Parkinson’s disease,PD）的患病率逐年上升。大量的ROS诱发氧化应激,造成大脑神经元发生进行性、不可逆转的退化和缺失是这些疾病的共同病理特征。基于干细胞移植的细胞替代疗法为脑神经退行性疾病的治疗开辟了新途径。神经干细胞（Neural stem ce
背景和目的骨关节炎（Osteoarthritis,OA）是临床上常见的关节软骨退行性疾病。病理机制主要是软骨合成减少、软骨降解增多,最终导致软骨层不完整,软骨下骨形成和骨赘形成。目前,骨关节炎已成为科学家们关注的重要研究课题。组蛋白去乙酰化酶（Histone deacetylases,HDACs）介导的去乙酰化修饰属于表观遗传学范畴。越来越多的研究表明,表观遗传学的改变是OA的易感因素。组蛋白去乙
糯扎渡库区是澜沧江航道的重要组成部分,目前库区航道内的船舶所排放出的废气和油污,对澜沧江流域大气和水体造成了极大污染,且船舶燃油消耗量逐年升高,燃料费用每年均呈上升趋势,对澜沧江航运事业的发展造成了阻碍。如何减少船舶污染物排放,降低水路运输成本,成为当前澜沧江航运发展亟待解决的问题。鉴于此,本文致力于探究以液化天然气（Liquefied Natural Gas,简称LNG）燃料替代传统船用燃油对糯
自古人择水而居,城临水而建、因水而兴。海绵城市不仅是我国生态文明建设的一个重要组织部分,也为城市发展提供了一条可持续发展和绿色发展的新道路,推动城市从“资源依赖性”向“创新驱动型”转变。随着城市化进程的推进,雨水资源浪费、城市水资源短缺、水安全收到威胁、城市内涝突出等问题日渐严峻,为有效改善城市水环境,党中央启动了海绵城市建设试点工作。根据国内外海绵城市建设的案例分析,真正成功的项目是通过实现的价
数字赋能为提升企业全要素生产率提供了“弯道超车”的新契机。本文利用2011—2020年中国1075家沪深A股制造业上市公司的数据，运用面板固定效应和中介效应模型，验证了数字赋能与企业全要素生产率之间的关系，并创新性地提出产业链整合的逻辑框架和测量方法。研究发现：数字赋能促进了企业全要素生产率，数字赋能提升1单位，企业全要素生产率提升0.26%;数字赋能通过提升企业专业化分工水平和供应链效率等进行产
目的:为解决肿瘤特异性抗原对机体免疫系统激活不足而导致肿瘤疫苗抗肿瘤效率低下的问题,我们利用碘化油合成一种纳米乳佐剂,将肿瘤抗原与纳米佐剂制备成碘化油纳米疫苗,探究了碘化油纳米疫苗在体内外的免疫活性以及作用机制,并评估了其在体内的稳定性、靶向性、生物安全性及抗肿瘤效果。方法:1)合成碘化油纳米乳佐剂并制备碘化油纳米疫苗,对制剂进行表征与性能检测。使用乳化法合成水包油型的碘化油纳米乳,通过在其表面插
背景:骨稳态是机体通过多途径调节来使骨量维持在正常范围之内的一种动态平衡,受破骨细胞（Osteoclasts OCs）和成骨细胞的双重调节,其中破骨细胞发挥的作用不可估量。骨重塑过程中破骨细胞的过度活跃与多种溶骨性疾病息息相关,如:骨质疏松,癌症,关节置换术后假体松动以及骨关节炎相关的骨破坏等。破骨细胞是骨质流失过程中的必要环节,它发挥着重要的功能。破骨细胞是融合形成的巨大细胞,多细胞核和骨吸收功
目的:腱-骨界面的修复过程一般都是疤痕组织的形成,无法恢复到天然的形态及结构,也很难达到理想的生物力学强度效果。随着对天然腱-骨结构的微观解析,界面结构与其功能的紧密联系的重要性也愈加突显,模仿天然组织结构的组成来改善受损组织的再生修复策略成为了组织工程新的选择。磷酸钙液态前驱体（Ca P-PILP）,一种数纳米尺度的矿化材料,可作为基元实现精确的仿生矿化,从而实现肌腱-骨界面的仿生重构。意义:本
目的:研究HIV-1感染经ART治疗患者血浆外泌体WNT信号通路m RNA差异表达,对比分析HIV-1感染经ART治疗患者与健康对照者血浆外泌体WNT信号通路m RNA的表达,了解HIV-1感染经ART治疗患者血浆外泌体WNT信号通路相关调控基因和相关功能基因种类、数量变化规律,寻找具有特征性的差异分子,为早诊断、早治疗、清除病毒储存库在内的多种策略提供侯选指标,为了解和早日攻克艾滋病以及其它相关