酶催化阿魏酸乙酯与甘一酯的酯交换反应合成阿魏酰基结构脂的研究

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阿魏酸较低的脂溶性较限制了它的应用和生物活性。将阿魏酸同一些脂溶性较强的分子相结合,可保持阿魏酸诸多的生物活性,又可增加其亲脂性,从而扩大其应用范围。单硬脂酸甘油酯此前一直被用作食品、化妆品及医药膏的乳化剂,属于绿色添加剂。因此,本实验采用单硬脂酸甘油酯作为阿魏酰基的受体具有重大的意义。本文主要研究了脂肪酶催化阿魏酸乙酯(EF)与单硬脂酸甘油酯的酯交换反应,分析和比较了三种体系(无溶剂体系、离子液体体系及有机溶剂体系)中的反应规律,探讨并建立了反应的热力学模型和动力学模型。在无溶剂体系中,研究了反应时间、反应温度、加酶量及底物比对EF的转化率的影响,并以反应时间、反应温度和加酶量作为响应面的三个因素进行响应面设计和优化。无溶剂体系下的最佳工艺条件为:反应温度74℃,反应时间23h,加酶量20%(以底物总质量计,w/w)。通过验证,在最优条件下可获得EF转化率为98.3±0.2%,其产物组成为:阿魏酰基甘油(FG)19.2%,二阿魏酰基甘油酯(DFG)32.9%,阿魏酰基单脂肪酰基结构脂(FMAG)36.6%,阿魏酰基二脂肪酰基结构脂(FDAG)9.1%及阿魏酸(FA)0.5%。该体系中水解生成FG+DFG的反应的活化能为22.45kJ/mol,酯交换生成FMAG+FDAG的反应的活化能为51.05kJ/mol。在离子液体体系中,通过比较不同离子液体对反应的影响,筛选出离子液体[Emim]TF2N为最佳溶剂。研究了反应时间、反应温度、加酶量及底物比对EF的转化率的影响,并以反应时间、反应温度和加酶量作为响应面的三个因素进行响应面设计和优化。([Emim]TF2N体系下的最佳工艺条件为:反应温度为78℃,反应时间为30h,加酶量为18.5%,在此条件下,得到的EF转化率为98.4±0.5%,产物组成为FG(31.1%),DFG(48.9%),FMAG(13.7%),FDAG(4.2%)及FA(1.5%)。该体系中水解生成FG+DFG的反应的活化能为52.35kJ/mol,酯交换生成FMAG+FDAG的反应的活化能为48.86kJ/mol。本反应符合乒乓Bi-Bi机制,所得动力学参数为:K AM=0.01mol/L、K BM=0.19mol/L及VM=4.13×10-4mol/L·min。在有机溶剂体系中,通过比较不同有机溶剂对反应的影响,筛选出正己烷为最佳溶剂。研究了反应时间、反应温度、加酶量及底物比对EF的转化率的影响,并以反应时间、反应温度和加酶量作为响应面的三个因素进行响应面设计和优化。最佳工艺条件为:反应温度63℃,加酶量19%,反应时间25h。在此最优条件下对模型进行了验证,EF转化率为72.7±1.5%,其反应产物组成为:FG(38.1%),DFG(16.1%),FMAG(8.5%),FDAG(0.5%)及FA(9.0%)。该反应中单硬脂酸甘油酯的水解反应的活化能为83.35kJ/mol,单硬脂酸甘油酯与EF的酯交换反应的活化能为104.46kJ/mol。
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