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糖尿病是一种多病因的代谢疾病,是由胰岛素绝对或相对不足而引起,以慢性高血糖为特征,常伴有脂肪和蛋白质代谢紊乱。根据美国糖尿病病理学会2009年公布的糖尿病诊断标准,目前糖尿病按病因分为四型,其中二型糖尿病（T2DM）是目前最常见的,大概占糖尿病人群总数的93.7%。随着现代人们生活水平的升高,人口老龄化以及肥胖率的增加,糖尿病的发病率逐年升高,严重的影响到人类的健康和生活质量。高糖高脂饲料加链脲佐菌素（STZ）制备大鼠T2DM模型具有高血糖和胰岛素抵抗两个重要特征,接近人类T2DM的病变特征,是目前常用的诱发T2DM方法之一。赤雹根为葫芦科多年蔓生草本植物赤雹Thladiantha dubia Bunge的干燥成熟块根,民间主要用于治疗跌打损伤、臃肿、关节肿痛、行经腹痛、气滞胸痛、乳房胀痛等,具有重大研究和开发价值。赤雹根（RTD）主要成分为皂苷、生物碱、多糖、蛋白质、氨基酸等多种化合物。据报道,多种皂苷类成分具有治疗糖尿病的潜力。本研究以高糖高脂饲料加STZ制备大鼠T2DM模型,以盐酸二甲双胍（MHT）作为阳性对照药,以T2DM大鼠血糖、血脂、血清胰岛素水平、肝脏和胰岛的形态学观察等指标来评价赤雹根总皂苷（STDR）治疗T2DM的作用;通过测定T2DM大鼠血清ADP和AGEs水平,检测肝脏和血清中MDA含量、SOD和GSH-Px活力观察STDR对高血糖导致的组织损伤的保护作用,为STDR临床上治疗T2DM提供实验依据。采用薄层硅胶柱色谱、高效液相色谱法、半制备柱色谱法、液质联用、IR、NMR等对STDR进行分离、纯化、鉴定,确定其化学结构,为寻找STDR治疗T2DM的活性成分奠定物质基础。第一部分赤雹根总皂苷治疗大鼠2型糖尿病药效学研究目的:观察STDR对高糖高脂饲料加STZ诱发的大鼠T2DM的治疗作用,为赤雹根STDR治疗T2DM的临床应用提供实验依据。方法:1大鼠T2DM模型的制备、分组及给药:wistar大鼠,雄性,体重200-220g,用高糖高脂饲料加腹腔注射STZ 35 mg·kg-1·d-1制备T2DM模型,空腹血糖（FPG）大于16.7mmol·L-1为造模成功。将造模成功的大鼠按FPG分层随机分为STDR 160 mg·kg-1·d-1组（STDR-H）、STDR 80 mg·kg-1·d-1组（STDR-L）、MHT 100 mg·kg-1·d-1组（MHT）和模型对照组（DC）。各组分别灌胃给予相应药物3周。2检测指标:每天观察各组大鼠活动情况,记录各组实验大鼠的饮水量计算平均值,每周固定时间称体重一次;禁食12h,尾静脉取血,用血糖仪测给药前和给药后0.5h、1h、2h、4h、6h、7d、14d、21d FPG值,以DC组大鼠的FPG值作为参比,计算受试物降血糖率;水合氯醛麻醉,腹主动脉取血,采用全自动生化分析仪测定大鼠血清中FPG、INS、TC、TG、HDL-C、LDL-C、ALT、AST和ALB水平,计算胰岛素抵抗指数（IRI）和胰岛素敏感指数（ISI）;取肝脏、胰腺称重,计算脏器指数,甲醛固定,HE染色,光镜下观察肝脏和胰腺组织。结果:所制备T2DM模型大鼠较正常大鼠明显多饮、多食、多尿,且喜卧、弓背、毛发灰暗。STDR能明显减轻T2DM大鼠体重下降的趋势和多饮的症状（P<0.05或P<0.01）;STDR能明显降低T2DM大鼠血清中FPG、TG、TC、LDL-C水平,升高HDL-C水平（P<0.05或P<0.01）;STDR能明显降低T2DM大鼠血清ALT和AST水平,升高ALB水平（P<0.05或P<0.01）;STDR能明显降低T2DM大鼠INS和IRI,增加ISI（P<0.05或P<0.01）;光镜下病理学观察显示STDR对T2DM大鼠肝脏组织和胰腺细胞有保护作用。结论:STDR可明显降低高糖高脂饲料加STZ诱发的T2DM大鼠血糖和血脂水平,改善T2DM大鼠胰岛素抵抗程度,对高血糖诱发的肝脏和胰腺损伤有明显的保护作用。第二部分赤雹根总皂苷对2型糖尿病大鼠组织损伤相关因素的影响目的:以血清中ADP和AGEs表达水平、肝脏和血清中MDA浓度、SOD和GSH-Px活力为指标,初步阐明STDR在改善T2DM症状延缓T2DM并发症及对肝脏、胰腺保护作用的因素。方法:T2DM模型的制备、分组及给药同第一部分。水合氯醛麻醉,腹主动脉取血,采用ELISA法检测血清ADP和AGEs水平,用相应的试剂盒检测各组大鼠肝脏、血清中MDA浓度、SOD和GSH-Px活力。结果:STDR能明显升高T2DM大鼠血清ADP水平,降低血清AGEs水平;STDR能显著降低T2DM大鼠血清和肝脏MDA含量,升高血清和肝脏SOD活力和GSH-Px活力。结论:STDR能减少损伤T2DM大鼠组织的相关因素,提高保护T2DM大鼠组织的相关因素,这对控制T2DM及其并发症的发生发展具有积极作用。第三部分赤雹根总皂苷单体成分研究目的:分离STDR中的单体化合物,为筛选治疗T2DM有效单体成分奠定基础。方法:赤雹根用70%乙醇提取,提取液依次用石油醚、氯仿、水饱和正丁醇萃取,水饱和正丁醇萃取物过AB-8大孔树脂,并依次用10%、30%、70%乙醇洗脱。所得70%乙醇洗脱物即为总皂苷部位。应用薄层硅胶柱色谱,高效液相色谱法,液质联用等对STDR进行分离、纯化,得到的单体化合物通过IR、NMR和质谱等先进技术鉴定,确定化合物的结构。结果:从STDR中分离出4个并鉴定了其中1个化合物,名为3-O-β-D-葡萄吡喃糖基（1→3）[β-D-半乳吡喃糖基（1→2）]-β-D-葡萄吡喃糖基-皂树酸-28-O-β-D-木吡喃糖基（1→3）-β-D-木吡喃糖基（1→3）α-L-鼠李吡喃糖基（1→2）α-L-阿拉伯吡喃糖基苷。