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[研究背景]1型糖尿病(T1DM)是器官特异性的自身免疫性疾病,主要特征为慢性、渐进性胰岛β细胞的破坏,导致胰岛素严重缺乏。细胞因子被认为在自身免疫调节和胰岛β细胞凋亡中起到了重要的作用。促炎性细胞因子会影响许多基因的表达并且调节各种促凋亡、抗凋亡信号通路。已有的研究指出lncRNA可能参与维持胰岛β细胞功能和胰岛素信号传导,从而影响糖尿病的发生发展。我们课题组前期探讨及分析细胞因子干预后小鼠胰岛细胞株MIN6中的长链非编码RNA表达谱的变化,初步证实了 12条lncRNA在细胞因子干预组中的异常表达,且结果与芯片表达趋势一致。提示细胞因子干预后小鼠胰岛细胞株MIN6中的lncRNA表达谱发生了显著变化,某些差异表达的lncRNA在细胞因子诱导的胰岛β细胞凋亡中可能具有重要作用。[目的]选取在前期实验细胞因子干预的小鼠胰岛细胞株MIN6中得到初步验证的15条差异表达的lncRNA进一步在1型糖尿病模型小鼠胰腺组织中进行验证。为后续深入研究lncRNA在1型糖尿病中的作用提供实验基础。[方法]20只清洁级ICR小鼠分为两组,模型组12只,对照组8只,采用小剂量多次STZ(链脲佐霉素)给药方式腹腔注射小鼠构建1型糖尿病模型鼠,正常对照组于同等条件下给予腹腔注射相同体积的柠檬酸钠缓冲液。模型制备成功后,提取小鼠胰腺组织中的RNA,采用实时荧光定量PCR方法对部分在小鼠胰岛细胞株MIN6中得到初步验证的差异表达的lncRNA进行验证。[结果](1)成功构建了 1型糖尿病模型小鼠,在MLD—STZ(小剂量多次链脲佐霉素给药)干预7天后,模型组小鼠随机血糖已较对照组明显升高,且持续升高≥1 1.1mmol/L,并出现进食量增加、饮水量增加、尿量增多和体重的下降;实验结束时,模型组小鼠体重为(31.79±1.68)g,对照组的体重为(42.13±1.38)g,较对照组明显减轻;模型组小鼠血清胰岛素水平(33.32±6.19uIU/ml)较对照组(55.21±10.83uIU/ml)明显下降;组织病理学显示:模型组小鼠胰腺组织中胰岛萎缩,形态变小,总数量减少,胰岛内胰岛细胞数目明显减少且融合,出现空泡样玻璃样变性,核固缩和核溶解等胰岛细胞凋亡改变,且胰岛内及周边出现淋巴细胞浸润。(2)我们选择经细胞验证的15条lncRNA在两组小鼠胰腺组织中进行验证。结果显示:NONMMUT036704、NONMMUT034373、NONMMUT042324、NONMMUT053106、NONMMUT014853、NONMMUT 034526、NONMMUT029257 和 NONMMUT005834 这 8 条 lncRNA 在两组小鼠间表达有差异,且差异有统计学意义;另外7条NONMMUT009926、NONMMUT039557、NONMMUT029240、NONMMUT029347、NONMMUT 056688、NONMMUT065500 和 NONMMUT037919 表达水平无明显差别。[结论]芯片筛查结果可信,某些差异表达的lncRNA可能直接或间接影响了 1型糖尿病的发生及发展。