三种中药复方对鲤鱼生长及免疫性能影响的研究

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本文采用灌服的方法,研究了三种复方中药水煎剂对鲤鱼生长、免疫以及血液生理生化指标的影响,探讨定量给药后复方中药对鲤鱼的作用效果,为筛选中药复方免疫添加剂提供依据。试验选用健康1龄鲤鱼,按平均体重分四组,每组40尾,设置两个重复在相同条件下喂养。按日用添加剂的剂量连续灌服中药28天后采样检测各项指标,并注射细菌行抗原以产生免疫应答时中药组与对照组的差别。生长试验结果显示,中药组的鲤鱼的增重率均比对照组有显著的提高。血清生化指标的检测结果为,复方AH、AB在有细菌性抗原侵入时能提高血清中总蛋白(TP),白蛋白(ALB)及球蛋白(GLB)的含量。复方AH能显著提高血清中碱性磷酸酶(AKP)的含量。反应肝功能的指标中,谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的含量均能被三种中药显著降低。复方CD组显著提高了血清中尿素氮(BUN)和肌酐(CREA)的含量。当有细菌性抗原侵入机体时,AH和AB组均能显著提高血清中铁的含量。血清内补体C3、C4研究结果表明,未注射细菌性抗原时三种中药复方均能使C3、C4含量显著高于对照组;注射细菌性抗原后,仅C4含量显著高于对照组。NO和NOS的研究结果显示了较大的组织差异性。血清中,中药组鲤鱼NO和NOS的含量均显著高于对照组,而肝脏中仅在注射细菌性抗原后中药组iNOS的含量会显著高于对照组。本研究还检测了复方中药对鲤鱼血清免疫球蛋白含量的影响。采用盐析法和葡聚糖凝胶层析法相结合分离纯化鲤鱼血清中的IgM,并通过SDS-PAGE及Western-blot技术对纯化蛋白的部分特性进行分析并制备兔抗鲤IgM抗血清,用ELISA方法检测了对照组和中药组鲤鱼血清中IgM的含量。结果表明:33%硫酸铵溶液可以沉淀血清中大部分蛋白,但仍有较多电泳条带,其中含有74.8 kDa和26.1 kDa的条带,因此仅可作为免疫球蛋白粗提的方法;而凝胶层析法所提蛋白则仅有上述重链(74.8kDa)和轻链(26.1kDa)。Western-blot结果显示,兔抗鲤Ig抗体可与74.8kDa及26.1kDa条带发生特异性发应。将提纯的蛋白免疫实验兔后可制得高效价的兔抗血清,用于ELISA实验后得出结果:中药CD复方能显著提高鲤鱼血清中免疫球蛋白IgM的含量。综合以上结果得出:所选的三种复合复方均在不同程度上对鲤鱼的生长和免疫起到了促进作用。
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