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目的:胃癌(Gastric Cancer,GC)在世界范围人群中的发病率及死亡率居高不下,是严重威胁人类健康的重大疾病之一。目前,胃癌的转移复发和耐药仍是其治疗过程中所面临的两大主要难题,而肿瘤干细胞(Cancer Stem Cell,CSC)在其中发挥着重要的作用。CSC是一群具有自我更新、无限增殖、多向分化以及极强致瘤性的肿瘤细胞亚群,这类细胞被认为是肿瘤的起源细胞。WNT信号通路的异常激活被认为与CSC的分化和自我更新密切相关。WNT2作为WNT信号通路中的19个分泌型配体蛋白之一,全名为无翅类型的小鼠乳腺癌病毒整合位点家族成员2(Wingless-type MMTV integration site family,member2),目前已被报道在胰腺癌、非小细胞肺癌、结直肠癌、食管癌等癌症中调节肿瘤细胞的恶性进程。然而,WNT2在胃癌干细胞中的功能以及作用机制尚不清楚。方法:采用SYBR Green实时荧光定量PCR与普通PCR检测WNT2在胃癌干细胞及其诱导分化的胃上皮状细胞的mRNA表达量,采用Western blot检测WNT2在胃癌干细胞及其诱导分化的胃上皮状细胞中的蛋白表达量。利用人WNT2重组蛋白与WNT通路抑制剂处理胃癌干细胞并观察其成球情况与集落形成情况,并用Western blot检测WNT2重组蛋白是否促进干性相关基因SOX2及NANOG的表达。利用UALCAN与Kaplan-Meier Plotter数据库分析WNT2在胃癌组织中的表达情况以及胃癌患者的总生存率。结果:本研究发现WNT2在胃癌干细胞成球状态下的mRNA及蛋白表达水平皆显著高于其贴壁分化后的表达水平。采用人WNT2重组蛋白处理成球状态的胃癌干细胞后,发现其成球能力与未处理组相比明显加强,同时其干性相关基因的表达也明显上调。采用人WNT2重组蛋白处理其分化后的胃上皮状细胞,发现胃上皮状细胞的集落形成能力与未处理组相比也显著加强。而WNT通路抑制剂则显著降低了胃癌干细胞的成球能力和其干性相关基因的表达,同时也显著抑制了其分化后的胃上皮状细胞的集落形成能力。此外,我们还发现随着胃癌干细胞的成球生长,WNT2表达逐步提高,并且与Activeβ-catenin和干性相关基因SOX2及NANOG的表达呈正相关。临床水平上,通过数据库中的大量临床样本的对比表明:与正常胃组织相比,WNT2在胃癌组织中的表达显著升高(P<0.0001),并且低表达WNT2的胃癌患者的总生存率显著高于高表达WNT2的患者(P<0.01)。结论:胃癌干细胞可能通过自分泌WNT2的方式激活自身的WNT/β-catenin通路,进而通过Activeβ-catenin调控下游基因维持自身的干细胞特性。靶向胃癌干细胞分泌的WNT2蛋白发展中和性抗体药物或小分子抑制剂,将会为胃癌的治疗提供新的策略。