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目的：观察蝎毒多肽提取物（PESV）联合5-氟尿嘧啶（5-Fu）对H22肝癌的生长、微血管密度及NF-κBp65、MMP-9和VEGF表达的影响，进一步揭示PESV抗癌的作用机制，以为其辅助传统化疗药物用于临床抗肿瘤治疗提供理论依据。方法：1.建立小鼠H22肝癌皮下荷瘤模型，随机分为荷瘤对照组、PESV组、化疗组（即5-Fu组）和联合组（即PESV+5-Fu组)，每组10只，连续干预21天。隔日测量肿瘤体积，绘制肿瘤体积增长曲线并计算抑瘤率，观察PESV联合5-Fu对H22肝癌移植瘤生长的抑制作用。2.常规HE染色，光镜下观察H22肝癌组织病理学改变。3.CD34标记肿瘤微血管，检测H22肝癌组织微血管密度（MVD），观察PESV联合5-Fu对H22肝癌血管生成的影响。4.免疫组织化学和Western blot法检测H22肝癌组织NF-κBp65、MMP-9和VEGF蛋白表达水平。5.RT-PCR法检测H22肝癌组织NF-κBp65、MMP-9和VEGF mRNA表达水平。结果：1. PESV联合5-Fu对小鼠H22肝癌移植瘤生长的影响药物干预后，PESV组、化疗组和联合组小鼠H22肝癌移植瘤体积增长速度较荷瘤对照组均明显减慢，瘤重亦显著降低，抑瘤率分别为18.98%、25.59%、44.24%，差异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）；与化疗组比较，联合组的瘤重和肿瘤体积亦均存在显著差异（P＜0.05）。2.各组肿瘤组织的病理学变化HE染色显示，联合组可见大面积坏死区，较多肿瘤细胞呈细胞核碎裂、核固缩等凋亡和坏死的形态学改变；荷瘤对照组坏死区较少，且坏死面积较小，肿瘤细胞生长旺盛，坏死及凋亡细胞较少；PESV组和化疗组亦有明显坏死，但坏死程度较联合作用组明显减轻。3、.PESV联合5-Fu对H22肝癌组织新生血管形成的影响与荷瘤对照组比较，联合组MVD明显降低，差异有统计学意义（P＜0.01），化疗组MVD亦降低（P＜0.05）；与PESV组和化疗组比较，联合组MVD亦明显降低（P＜0.01）。4、PESV联合5-Fu对H22肝癌组织NF-κBp65、MMP-9和VEGF蛋白表达的影响免疫组织化学法检测结果显示，与荷瘤对照组比较，联合组NF-κB p65、MMP-9和VEGF表达量均显著减少（P＜0.01）；与化疗组比较，联合组NF-κB p65、MMP-9和VEGF表达量亦明显减少（P＜0.01）；相关分析得出，NF-κB p65、MMP-9和VEGF的蛋白表达量均与MVD成正相关（P＜0.01）；NF-κB p65和MMP-9、NF-κB p65和VEGF、MMP-9和VEGF之间的蛋白表达量亦存在显著正相关（P＜0.01）。Western blot法检测结果与免疫组织化学法结果基本一致。5、PESV联合5-Fu对H22肝癌组织NF-κBp65、MMP-9和VEGF mRNA表达水平的影响RT-PCR法检测结果显示，与荷瘤对照组和化疗组比较，联合组NF-κB p65、MMP-9和VEGF mRNA表达均明显减少（P＜0.01）；NF-κB p65和MMP-9、NF-κB p65和VEGF、MMP-9和VEGF之间的mRNA表达量均存在显著正相关（P＜0.01）。结论：1. PESV联合5-Fu可明显抑制小鼠H22肝癌移植瘤的生长及新生血管形成；2. PESV联合5-Fu可抑制NF-κBp65、MMP-9和VEGF转录和蛋白表达，这可能是PESV联合5-Fu抑制H22肝癌生长和血管生成的机制之一。