防风多糖的分离纯化及结构分析

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防风为伞形科多年生草本植物防风Saposhnikovia divaricata (Turcz.)Schichk未抽花植株的干燥根。多生于草原丘陵多石砾的山坡上。主要分布在我国的东北,华北等地。为常用中药,具有祛风解表,胜湿止痛,解痉等功效,主治外感风寒,头痛,目眩,项强,风寒湿痹,骨节酸痛,四肢挛急等。防风中主要的化学成分有挥发油,色原酮,香豆素,有机酸,聚乙炔类,无机元素,多糖等。为主要对人体起免疫作用的经典名方玉屏风散(由黄芪,白术和防风组成)的组方药之一。多糖是玉屏风中起疗效作用的主要成分。目前从黄芪、白术和防风中分离出来的多糖分别有16、8和5个,相对来说对防风多糖研究的还比较薄弱,本文以栽培防风为研究对象,对栽培防风中的多糖进行了分离纯化及结构研究。通过水提,醇沉,脱蛋白,透析后,上DEAE—Spharose fast flow柱后分离得到了两个酸性多糖SPSa和SPSb,经初步鉴定,其结构与以往报道的防风多糖不同,可能为新的防风多糖。 在防风多糖的分离纯化中,以多糖保留率以及脱色率为考察指标,研究了八种不同的树脂对防风粗多糖的脱色效果。仅从脱色率考察,脱色效果依次为D280>D392>201×4>D3520>201×7>NKA-Ⅱ>NKA-9>001×7。通过对脱色效果较好的两种树脂柱容量的对比,表明D280对防风多糖的脱色效果优于D392。它们的最佳上样量均为0.04g/g(湿树脂),此时二者的脱色率分别为84.3%和76.4%,而多糖保留率分别为80.6%和82.7%。结论是防风多糖的脱色宜选用大孔阴离子交换树脂。 在结构分析中,采用了紫外光谱,凝胶色谱,红外光谱,薄层色谱和毛细管电泳对分离出的酸性多糖SPSa和SPSb进行了纯度鉴定以及化学结构的分析。紫外光谱分析判断两种糖基本不含蛋白质。凝胶色谱分析初步估计出SPSa和SPSb的分子量都大于4万。红外色谱分析可知两个多糖都不具有甘露糖,都具有糖醛酸,单糖组成都以α—糖苷键为主,而且都表现出了吡喃环的吸收。薄层色谱证明SPSa中具有半乳糖,阿拉伯糖和鼠李糖,SPSb中具有半乳糖,阿拉伯糖,鼠李糖和木糖。毛细管电泳分析表明SPSa中各单糖的组成及比例为:半乳糖:阿拉伯糖:鼠
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