从疾病调查到疾病易感基因研究

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中国的56个少数民族中,有26个分布在云南,其中15个少数民族为云南所独有,本次调查的怒族和独龙族就是云南所独有的少数民族群体。由于地理、交通及历史原因,这两个民族一直保持相对隔离的状态,形成隔离群体。本课题组分别于2003年、2006年11月、2007年4月先后三次到怒江州贡山县丙中洛、独龙江乡进行了遗传资源信息收集、疾病调查及医疗卫生、教育状况实地调查。通过我们的调查了解了这两个少数民族地区主要疾病分布情况,消灭疟疾与肺结核仍然是今后面临的艰巨任务,同时艾滋病在当地也开始出现并有发展趋势。云南是我国的主要疟疾流行区,疟疾发病率居全国第1位,占全国病例总数的30%以上。云南的疟疾主要集中在西部和南部边境地区,世代居住于云南怒江的怒族、独龙族正处于这一疟疾高发区。近年来,国内外的一些研究发现,NOS2基因的突变可以起到抵抗疟疾的作用。一氧化氮合酶(NOS)是催化NO合成的关键酶,目前发现的人NOS基因可分为三型:Ⅰ型NOS又称为脑型(bNOS)、神经型(nNOS)或NOS1,Ⅱ型NOS又称为诱导型(iducible NOS,iNOS)或NOS2,Ⅲ型NOS又称为内皮型(eNOS)或NOS3。其中NOS2基因在细胞因子、内毒素等诱导下可产生大量NO,参与多种疾病的病理生理过程。一氧化氮合酶(NOS)能催化L-精氨酸反应生成NO,NO作为一种可在细胞间自由扩散的信使分子,在神经递质的传递、血管舒张调节以及感染性疾病和肿瘤的保护性免疫等过程中起重要作用。许多实验证明,NO在疟原虫感染的保护性免疫中起重要作用。NOS2基因启动子区域的G-954C、C-1173T两个SNP位点与疟疾的发生有一定的相关性。我们选取云南怒江怒族健康人群84例作为研究对象。提取基因组DNA,利用嵌套式等位基因特异性引物PCR技术检测NOS2G-954C SNP与NOS2C-1173T SNP,然后通过琼脂糖凝胶电泳检测PCR反应产物,并利用凝胶成像仪在紫外灯下观察拍照。研究结果显示:在84例研究对象中,NOS2G-954C SNP的基因型频率分别为:G/G 63.10%、G/C 32.14%、C/C 4.76%,其等位基因频率分别为:G 79.17%、C20.83%;NOS2C-1173T SNP的基因型频率分别为:C/C 58.33%、C/T 30.95%、T/T10.71%,其等位基因频率分别为:C 73.81%、T 26.19%。
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