【摘 要】
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以玉米(Zea mays)幼胚诱导的愈伤组织为转化受体,用基因枪轰击的方法分别将含有RBSDV基因组片段3全序列的真核表达载体pAct-S3与筛选质粒pAHC25,以及含有2-5A合成酶和RNaseL
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以玉米(Zea mays)幼胚诱导的愈伤组织为转化受体,用基因枪轰击的方法分别将含有RBSDV基因组片段3全序列的真核表达载体pAct-S3与筛选质粒pAHC25,以及含有2-5A合成酶和RNaseL的真核表达载体2-5A同pAHC25分别其转化玉米,用Basta筛选2个月后,将抗性愈伤转移至高糖培养基上诱导分化成苗.转化2-5A的玉米愈伤组织中共获得再生植株107株,其中6株为PCR检测阳性植株,其中两株可育.从采自湖北天门感染玉米粗缩病的玉米叶片中提取水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarfvirus,RBSDV)的双链RNA.通过RT-PCR,获得了RBSDV湖北玉米分离物基因组片段8(HB-S8)的全长cDNA克隆和全序列.同源性比较证实了引起湖北玉米粗缩病的病原为RBSDV.另外,构建了含RBSDV HB-S8 ORF的原核表达载体并在大肠杆菌中进行了表达,并以此蛋白免疫家兔,制备了抗血清.
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