论文部分内容阅读
目的：在AngⅡ诱导的心肌肥厚大鼠模型上评价AngⅡ及其受体亚型AT1在心肌肥厚中的作用,观察DMP811(AT1拮抗剂)、培哚普利(ACEI)和氨氯地平(钙通道拮抗剂)对AngⅡ诱导的心肌肥厚大鼠心肌AT1基因和心肌肌浆网Ca2+-Mg2+-ATPase基因(SERCA2a)以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原基因表达的影响,并对心肌肥厚时AT1基因、SERCA2a和Ⅰ、Ⅲ型胶原基因表达水平间的相互关系进行探讨,从而为寻找阻滞心肌肥厚的新的有效措施提供一定的理论依据。方法：1.动物模型的建立：将25只6周龄的SD雄性大鼠随机分为5组,每组5只.分别给予皮下埋藏装有生理盐水或AngⅡ的渗透微泵。(1)组：生理盐水输注(1μl/h)；(2)组：AngⅡ输注(200ng/kg/min);(3)组：AngⅡ输注+DMP811管饲(3 mg/kg/d);(4)组：AngⅡ输注+培哚普利管饲(10mg/kg/d);(5)组：AngⅡ+氨氯地平管饲(10mg/kg/d)。2.一周后称其体重,处死取其心脏并称重,采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)及胶原染色的方法分别检测心肌。3.偏振光显微镜下观察心肌超微结构变化。4.统计学处理：应用SPSS13.0统计软件分析数据,数据以均数加减标准差(x±s)表示,采用方差分析或多个样本两两均数的比较法,P<0.05表示有统计学意义。结果：1.输注AngⅡ7d对大鼠的体重无明显影响,但可使大鼠的心重、心重／体重显著增加。对照组心重650.0±19.6mg,心重／体重3.35±0.02；AngⅡ组的心重744.5±29.0mg,心重／体重3.76±0.03,AngⅡ+DMP811组心重是622.0±20.1mg,心重／体重是3.19±0.01；AngⅡ+培哚普利组心重是611.6±19.8mg,心重／体重3.13±0.01；AngⅡ+氨氯地平组心重627.2±23.Omg,心重／体重是3.2±0.02；AngⅡ组较对照组心重、心重／体重明显增加(P<0.05)；和AngⅡ+DMP811组、AngⅡ+培哚普利组、AngⅡ+氨氯地平组相比心重及心重／体重也明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05),而AngⅡ+DMP811组、AngⅡ+培哚普利组、AngⅡ+氨氯地平组的心重及心重／体重无显著差异(P>0.05)。2.对照组胶原Ⅰ、Ⅲ型转录水平分别是0.493±0.04,0.355±0.06；AngⅡ组胶原Ⅰ、Ⅲ型转录水平分别是0.602±0.02,0.439±0.04,AngⅡ组胶原Ⅰ、Ⅲ型转录水平高于对照组,它们分别比对照组增加(22.1±4.7)%和(23.6±4.9)%(P<0.01)；AngⅡ+DMP811组的Ⅰ、Ⅲ型胶原转录水平是0.398±0.02,0.269±0.52；AngⅡ+培哚普利组的Ⅰ、Ⅲ型胶原转录水平是0.439±0.03,0.249±0.03；AngⅡ+氨氯地平组的Ⅰ、Ⅲ型胶原转录水平是0.431±0.04,0.295±0.03。AngⅡ+DMP811组分别使Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA降至对照组的(19.3±4.7)%(P<0.05)和(24.2±15.7)%(P<0.05)；AngⅡ+培哚普利组分别使Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA降至对照组的(11.0±8.7)%(P<0.05)和(29.9±11.7)%(P<0.05)；AngⅡ+氨氯地平组分别使Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA降至对照组的(34.7±2.5)%和(16.9±10.3)%(P<0.05)。3.对照组AT1mRNA表达水平4.963±9.55,AngⅡ组AT1mRNA表达水平16.033±13.73,AngⅡ+DMP811组AT1mRNA表达水平2.41±4.74,AngⅡ+培哚普利组AT1mRNA表达水平是0.685±0.3,AngⅡ+氨氯地平组AT1mRNA表达水平是1.198±0.75。AngⅡ组的AT1 mRNA水平较对照组上调(84.7±3.5)%(P<0.01),DMP811、培哚普利及氨氯地平与AngⅡ合用,可以完全阻止AngⅡ诱导的AT1 mRNA的转录上调。4.对照组的SERCA2a基因转录水平是4.018±1.84,AngⅡ组的SERCA2a基因转录水平是0.254±0.06,AngⅡ+DMP811组的SERCA2a基因转录水平是3.76±2.33,AngⅡ+培哚普利组的SERCA2a基因转录水平是4.117±2.64,AngⅡ+氨氯地平组的SERCA2a基因转录水平是4.522±4.18。AngⅡ组的SERCA2a基因转录水平显著低于其他组(P<0.01),下调幅度达对照组(93.7±2.0%,P<0.01)。并且SERCA2a mRNA表达水平与AT1mRNA表达水平呈负相关(r=-0.84,P<0.01)。DMP811、培哚普利及氨氯地平与AngⅡ合用,不仅可以完全阻止AngⅡ诱导的SERCA2a表达下调,且还有增加SERCA2a表达的趋势,但无统计学显著性。从偏振光显微镜下观察到AngⅡ组心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白沉积也较其他组明显增加.结论：AngⅡ通过其1型受体的介导,上调心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原基因的表达,AngⅡ导致的上述改变能被DMP811、培哚普利、氨氯地平完全阻断,为日后防治CHF(充血性心衰)方面提供了重要的临床指导意义。