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研究背景:心力衰竭(HF)几乎是所有心脏疾病的终末阶段,其发病率、死亡率逐年攀升,给人类造成了极大的经济负担和生活压力,因此及时准确识别慢性心力衰竭患者是至关重要的。心肌营养因子-1(CT-1)是白细胞介素-6超家族的成员,是一种可以引起心肌细胞肥大和功能障碍的细胞因子,大量研究表明血浆CT-1可作为心力衰竭诊断、分期和预后评估的心脏生物标志物。然而,目前仍然缺乏较为高效的检测方法,难以实现对CT-1的快速、简易定量检测,极大的限制了心肌营养因子-1作为诊断标志物的临床研究进程。方法:本研究建立了一种基于微米磁颗粒及生物素-亲和素系统的CT-1化学发光免疫定量检测方法(MPs-CLIA),能够快速、灵敏检测血浆CT-1的含量。1.血浆心肌营养因子-1化学发光免疫定量检测方法学的建立及优化:制备生物素标记兔抗人CT-1多克隆抗体(bio-Ab)及吖啶酯标记兔抗人CT-1多克隆抗体(AE-Ab)。对血浆心肌营养因子-1化学发光免疫定量检测方法学进行优化:优化生物素标记抗人游离CT-1多克隆抗体(bio-Ab)及吖啶酯标记抗人游离CT-1多克隆抗体(AE-Ab)的浓度。优化抗原抗体反应时间、免疫复合物捕获时间、微米磁颗粒浓度等。2.血浆心肌营养因子-1化学发光免疫定量检测方法学的性能评价:对方法学的线性范围、灵敏度、准确度、精密度等方面的性能进行评价。3.血浆心肌营养因子-1的定量测定在心衰诊断中临床价值研究:分析了100名慢性心力衰竭患者和40名健康体检者的血浆CT-1、NT-pro BNP水平,初步评价CT-1对慢性心力衰竭的诊断价值。结果:1.本研究成功建立了CT-1化学发光免疫定量检测方法(MPs-CLIA),该方法在CT-1浓度为7.8pg/m L到2000pg/m L范围内具有良好的的线性关系,其校准曲线方程为RLU=32.646CCT-1+174.35(R2=0.9996),最低检出限为2.6pg/m L。用低浓度(10pg/m L)、中浓度(100pg/m L)和高浓度(800pg/m L)的质控品评估准确性,CT-1的回收率分别为96%、104%和110%。相对应的3个质控品的分析内变异系数(intra-analysis coefficient variation,CVs)分别为8.92%、6.69%和3.54%;分析间变异系数(inter-analysis coefficient variation,CVs)分别为9.25%、10.9%和4.3%。与IL-6、NT-pro BNP无交叉反应。这些结果强烈表明,MPs-CLIA方法具有灵敏度高、线性范围宽、精密度高、重复性好等优点。2.血浆CT-1定量测定对心衰诊断的价值研究。使用MPs-CLIA方法检测临床心力衰竭患者和健康体检者的血浆CT-1浓度,心力衰竭患者血浆CT-1浓度明显高于健康体检者(P<0.05),ROC曲线下面积为0.66。此外,血清CT-1浓度与NT-pro BNP成正相关(R2=0.398,P<0.001)。研究表明CT-1是心力衰竭诊断的生物标志物。结论:本研究所建立的MPs-CLIA方法学各项性能指标满足临床需求,该方法自动化程度极高,适用于临床检查中CT-1的高通量检测。且血浆CT-1的检测对辅助心力衰竭的诊断具有很好的应用前景。