柠檬草提取物纳米银的绿色合成及其抗菌保鲜作用研究

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果蔬的采后贮藏过程中常常伴随着水分散失,干物质损耗等现象从而导致果实腐烂,失去食用价值与商品性,不仅会造成大量的经济损失,更严重的还会对人体健康造成影响。纳米银由于其良好的抗菌性能而被应用到食品包装中,以延长食品的保质期。涂膜法常被用于果蔬的采后贮藏中。涂膜处理后的果蔬表面会形成一层薄膜,可以抑制果实的蒸腾作用与呼吸作用,纳米银的加入可以抑制果实中微生物的生长与代谢,并且可以改善涂膜的性质,使其保鲜效果更好。使用传统的物理化学法合成纳米银,存在着成本高,污染重等缺点,所以利用天然植物提取物绿色合成纳米银近年来引起研究者广泛关注。柠檬草在我国的产量大,分布广,成本低廉而且含有大量的柠檬醛、酚类物质、黄酮等活性成分,这些物质可以作为纳米银的还原剂与稳定剂。基于以上背景,本论文以柠檬草的水提物为还原剂和稳定剂在液相中还原硝酸银为纳米银,通过单因素实验和响应面设计得到制备银纳米粒子的最佳条件,在此条件下制备的纳米银通过一系列的技术手段对其表征。随后进行药敏实验,测定合成的纳米银对大肠杆菌和李斯特菌的抑菌效果。接着进行了结晶紫半定量粘附实验和荧光显微镜观察纳米银对两种细菌生物被膜的抑制与清除作用。最后将合成的银纳米与羧甲基纤维素制成复合涂膜液考察其安全性及对砂糖橘的保鲜效果。主要研究内容与结论如下:(1)以硝酸银为银源,柠檬草水提物为还原剂和稳定剂,常温常压下合成了纳米银。通过单因素实验和Box Behnken响应面实验设计优化得到最佳制备条件:提取液浓度0.008 g/m L,Ag NO3浓度8 m M和反应时间3 h。合成的纳米银为酒红色,颗粒具有面心立方晶体结构,呈球形且分布均匀,平均粒径大约为25 nm。(2)测定了合成的纳米银对大肠杆菌和李斯特菌的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度,并且测定了对生物被膜的抑制与清除作用,两种细菌的MIC范围为1.7-3.4μg/m L,MBC范围为3.4-6.8μg/m L,在较低浓度下就可以抑制与清除生物被膜,且抑制能力和清除能力与纳米银的浓度呈正相关。(3)通过ICP-MS测定证明了本实验制备的纳米银复合涂膜在果实中的残留量符合欧盟标准,应用在水果保鲜中是安全的。通过对失重率、可滴定酸含量、维生素C含量与p H值的测定以及对砂糖橘的外观观察,证明涂膜可以延长砂糖橘的贮藏期。复合涂膜组由于纳米银的添加,保鲜效果比只添加羧甲基纤维素的涂膜组效果好,可以延长大约3-6 d的货架期。
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