复方黄黛对NB细胞生长抑制和促调亡作用的研究

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:frankcody
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目的:研究纳米雄黄、青黛、复方黄黛对急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞株NB4细胞的生长抑制和促凋亡作用,从而为进一步研究复方黄黛治疗APL的作用机制及其主要有效成分提供佐证。 方法:本实验将通过对复方黄黛拆方研究,以APL细胞株NB4细胞为体外模型,实验组别为四组:空白对照组、纳米雄黄组、青黛组、复方黄黛组。实验分为两部分:(1)四噻唑蓝(MTT)法检测药物处理NB4细胞后,细胞的生长抑制情况:首先分别应用终浓度为0.1875~12mg·L-1纳米雄黄、0.235~15.04mg·L-1青黛、0.656~42mg·L-1复方黄黛处理NB4细胞24小时后,应用MTT法检测细胞生长抑制情况,并以药物浓度对数值对抑制率作线性回归,得直线方程,从中求出药物的半数抑制浓度(IC50),并将三个实验组的生长抑制率进行比较; 再分别应用终浓度为1.5mg·L-1纳米雄黄、1.88mg·L-1青黛、5.25mg·L-1复方黄黛处理NB4细胞,分别在用药后6小时、12小时、24小时、48小时、72小时用MTT检测细胞生长抑制情况,并将作用不同时间的三个实验组细胞的生长抑制率进行比较。利用单因素方差分析(ANOVA)统计各组间是否具有显著性差异。 (2)光学显微镜和透射电子显微镜观察药物处理NB4细胞后,细胞的形态学变化:分别应用终浓度为1.5mg·L-1纳米雄黄、1.88mg·L-1青黛、5.25mg·L-1复方黄黛处理NB4细胞24小时后,用瑞士—吉姆萨染色、HE染色和透射电镜观察NB4细胞形态学改变。 结果:(1)MTT法检测NB4细胞的生长抑制情况:0.1875~12mg·L-1纳米雄黄、0.235~15.04mg·L-1青黛、0.656~42mg·L-1复方黄黛处理NB4细胞24小时后,发现在这一浓度范围内,抑制程度随着药物浓度的增大而逐渐增强。其中,纳米雄黄的IC50为8.683mg·L-1,青黛的IC50为3818.172mg·L-1,复方黄黛的IC50为5.203mg·L-1。 (2)光学显微镜和透射电子显微镜观察NB4细胞的形态学变化:瑞士—吉姆萨染色及HE染色光镜下观察,可见纳米雄黄组、青黛组、复方黄黛组处理NB4细胞中出现凋亡细胞,细胞皱缩呈圆形或呈新月形。 结论:(1)纳米雄黄、青黛、复方黄黛对急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞株NB4细胞的生长抑制作用与时间、浓度呈正相关性;在复方黄黛中主要是纳米雄黄抑制APL细胞株NB4细胞的增殖,青黛抑制APL细胞株NB4细胞增殖的作用极小,但纳米雄黄和青黛对NB4细胞的增殖抑制具有协同作用,从而使复方黄黛对NB4细胞的增殖出现显著的抑制。 (2)复方黄黛对急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞株NB4细胞具有促凋亡作用,是治疗白血病的有效复方;复方黄黛通过诱导白血病细胞凋亡而达到治疗白血病的目的,可能是其作用机制之一。
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