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目的:研究人源诱导多能干细胞（human induced pluripotent stem cells,hiPSCs）来源的外泌体（hiPSCs-exosome,hiPSCs-Exo）的促血管生成能力,并对其中的分子机制进行初步探究,旨在为解决泌尿系组织工程修复过程中因移植物血供不良而导致修复失败提供新的思路。方法:（1）通过免疫荧光和流式细胞术鉴定hiPSCs的多能性标志物的表达;通过两步诱导法将hiPSCs定向分化为尿路上皮细胞,并通过实时定量聚合酶链反应（q RT-PCR）、Western blot和免疫荧光检测分化各阶段标志物的表达。（2）采用超速离心法获取hiPSCs-Exo,透射电镜观察hiPSCs-Exo的生物学特征,粒径分析仪检测hiPSCs-Exo的直径,Western blot鉴定hiPSCs-Exo中外泌体特异性标志物的表达。（3）采用PKH26染色标记hiPSCs-Exo,观察hiPSCs-Exo是否可以被人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）摄取;将hiPSCs-Exo与HUVECs共培养,通过CCK-8实验、划痕实验和血管形成实验检测HUVECs的增殖能力、迁移能力和促血管形成能力;q RT-PCR检测血管生成相关基因的表达。（4）选取C57/BL6J的小鼠随机分为3组:（1）假手术组（Sham组）;（2）模型组（Model组）;（3）hiPSCs-Exo组。Sham组仅暴露股动脉不做缺血处理,Model组和hiPSCs-Exo组通过结扎股动脉的方法建立小鼠下肢缺血模型,分别于第0天、4天、8天向小鼠股四头肌内多点（4处）注射PBS和hiPSCs-Exo。在第0天、7天、14天、21天采用激光多普勒血流仪检测三组小鼠下肢血流的恢复情况。在第14天和21天从各组随机抽取小鼠进行股四头肌免疫荧光染色检测下肢肌肉新生微血管密度。在第21天对剩余小鼠缺血下肢的肌肉行苏木精-伊红染色（hematoxylin-eosin staining,H＆E染色）观察肌细胞形态。（5）提取hiPSCs-Exo进行miRNAs高通量测序,筛选hiPSCs-Exo中高峰度表达且与血管生成相关的miRNAs;q RT-PCR验证测序结果;将Cy3标记的miR-103a-3p mimics转染hiPSCs后提取hiPSCs-Exo,观察miR-103a-3p是否可以被HUVECs摄取;利用慢病毒转染在HUVECs中分别过表达miR-103a-3p和敲低miR-103a-3p,通过血管形成实验检测miR-103a-3p对HUVECs促血管生成能力的影响。结果:（1）免疫荧光和流式细胞术结果显示hiPSCs中表达特异性蛋白NANOG、OCT4,符合hiPSCs的典型特征;qRT-PCR和Western blot结果显示诱导分化18天后的hiPSCs中表达尿路上皮标志物Uroplakin Ib（UPK Ib）和Uroplakin IIIb（UPK IIIb）（P＜0.001）。（2）透射电镜观察hiPSCs-Exo为圆形或椭圆形,直径约在40～150 nm之间,具有典型的“茶托状”结构,粒径分析结果显示平均直径为95.28nm,Western blot结果显示hiPSCs-Exo中表达外泌体特异性蛋白CD9、CD63和CD81,符合外泌体的典型特征。（3）PKH26染色结果显示hiPSCs-Exo成功被HUVECs摄取,并进入胞质中;CCK-8实验结果显示hiPSCs-Exo与HUVECs共培养后,HUVECs增殖能力增强（P＜0.05）;划痕实验结果显示hiPSCs-Exo与HUVECs共培养后,HUVECs迁移能力增强（P＜0.01）;血管形成实验结果显示hiPSCs-Exo与HUVECs共培养后,HUVECs血管生成能力增强（P＜0.01）;q RT-PCR结果显示hiPSCs-Exo与HUVECs共培养后,VEGF,Ang1,Ang2等血管生成相关基因表达均升高（P＜0.01）。（4）激光多普勒检测小鼠下肢血流的灌注情况结果显示相比于model组,hiPSCs-Exo组小鼠在术后第21天下肢血流恢复明显（P＜0.05）;免疫荧光结果显示hiPSCs-Exo组中CD31和CD34表达水平明显高于model组;H＆E染色结果显示hiPSCs-Exo组小鼠股四头肌细胞出现部分萎缩和凋亡,而model组小鼠股四头肌细胞萎缩和凋亡程度严重。（5）miRNAs高通量测序结果显示hiPSCs-Exo中存在大量miRNAs,根据表达丰度及q RT-PCR验证结果筛选出miR-103a-3p作为后续研究;cy3染料示踪miRNAs结果显示hiPSCs-Exo源性的miR-103a-3p可以被HUVECs所摄取;血管形成实验结果显示过表达miR-103a-3p后HUVECs的血管生成能力明显增强（P＜0.01）。结论:（1）hiPSCs经体外诱导可以定向分化为尿路上皮细胞。（2）hiPSCs-Exo能促进HUVECs增殖、迁移和血管生成能力,并能促进HUVECs中血管生成相关基因表达。（3）局部注射hiPSCs-Exo有助于改善小鼠缺血下肢的血流灌注情况,促进缺血下肢肌肉内血管的形成。（4）hiPSCs-Exo可能通过其包含的miR-103a-3p发挥促血管生成作用。意义:本研究为阐明hiPSCs-Exo在促血管生成作用机制提供理论依据,为解决泌尿系组织工程移植物易感染、血供差等问题提供新的思路,更好地实现hiPSCs-Exo的临床转化。