【摘 要】
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目的:上皮间充质转化（EMT）过程是导致肺癌发生转移的重要机制,研究影响EMT过程的分子机制对肺腺癌的治疗有着重要的意义。本次研究主要探究Epsin-3（EPN3）在肺腺癌组织中的表达情况,对肺腺癌患者疾病的预后意义,以及在肺腺癌细胞中EPN3的表达对肺腺癌细胞中对EMT过程的调控作用及对细胞侵袭与迁移能力的影响,并探究EPN3在此过程中调控的分子机制。方法:本次研究中,为了证明EPN3在正常肺组
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目的:上皮间充质转化（EMT）过程是导致肺癌发生转移的重要机制,研究影响EMT过程的分子机制对肺腺癌的治疗有着重要的意义。本次研究主要探究Epsin-3（EPN3）在肺腺癌组织中的表达情况,对肺腺癌患者疾病的预后意义,以及在肺腺癌细胞中EPN3的表达对肺腺癌细胞中对EMT过程的调控作用及对细胞侵袭与迁移能力的影响,并探究EPN3在此过程中调控的分子机制。方法:本次研究中,为了证明EPN3在正常肺组织与肺腺癌中的表达差异,首先通过生物信息学的方法,从TCGA数据库中获取肺腺癌与正常肺组织的表达谱数据,通过R软件中的Limma包做差异分析,并通过免疫组化实验测定EPN3在正常肺组织与肿瘤组织中的情况。通过划痕实验,Transwell侵袭与迁移实验通过调控EPN3的表达,肺腺癌细胞侵袭与迁移能力的变化,通过构建裸鼠尾静脉成瘤动物模型,并使用活体荧光成像证明EPN3调控后肺腺癌细胞在活体内的侵袭和迁移能力。随后通过免疫印迹（Western-Blot）证明EPN3的表达与EMT过程的分子联系及分子机制。结果:通过TCGA数据库的肺腺癌数据证明了EPN3在肺腺癌中异常高表达,并且通过免疫组化实验也证实了肺腺癌组织中EPN3的高表达。在肺腺癌细胞的体内外实验中,敲低EPN3的表达水平,能减弱细胞的迁移与侵袭能力。敲低EPN3的表达,能使细胞中上皮标志物E-Cadherin表达量上升,而间充质标记物N-Cadherin,Vimentin表达量下降,同时能使EMT转录因子（EMT-TFs）ZEB1与Snail以及WNT/β-Catenin通路中,β-Catenin的表达下降,证明EMT过程的抑制。结论:本课题证明通过EPN3的表达抑制,抑制在肿瘤中上皮特征蛋白E-Cadherin的表达缺失发生,并且抑制间充质特征蛋白NCadherin,Vimentin的表达,表明了在肺腺癌中EPN3的表达与肿瘤EMT过程相关,并且抑制EPN3的表达能抑制EMT过程上游的转录因子ZEB1与Snail的表达,同时也能抑制WNT通路关键分子β-Catenin的表达从而抑制EMT的过程,从而抑制肿瘤的侵袭与迁移。实验证明EPN3的表达能促进EMT的在肺癌中的发生从而促进肿瘤的侵袭与迁移。
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