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[目 的]卵巢癌是常见的妇科癌症,其发病率在妇科恶性肿瘤中排名第三,但其病死率位于妇科恶性肿瘤之首。既往研究表明lncRNA在肿瘤的发生、发展中发挥着重要作用。有报道lncRNAMEF2C-AS1能够抑制宫颈癌及乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,但尚未见其在卵巢癌中的生物学功能的研究。本研究通过细胞实验探索lncRNAMEF2C-AS1在卵巢癌恶性表型中的生物学功能及机制,为探讨卵巢癌发病机理提供理论及实验基础。[方法]1.培养人卵巢癌OVCAR3、A2780及SKOV3细胞和卵巢上皮IOSE80细胞,RT-qPCR检测lncRNAMEF2C-AS1在人卵巢癌细胞及卵巢上皮细胞株中的表达水平,选择lncRNAMEF2C-AS1水平最低的A2780细胞作为后续实验细胞。Western Blot实验检测卵巢上皮细胞和卵巢癌细胞中GRB7的蛋白质水平。2.培养A2780细胞,分别应用lncRNA MEF2C-AS1过表达慢病毒LV-MEF2C-AS1及阴性对照病毒LV-NC转染A2780细胞,培养48h后,RT-qPCR检测A2780细胞中lncRNAMEF2C-AS1的水平,明确lncRNAMEF2C-AS1的表达效率。3.将 A2780 细胞分为 LV-MEF2C-AS1、LV-NC 组,分别转染 LV-MEF2C-AS1和LV-NC,分别通过CCK8实验、克隆形成实验、Transwell侵袭实验、划痕实验及流式细胞术检测卵巢癌细胞的增殖活力、克隆形成能力、侵袭能力、迁移能力及细胞的周期分布和调亡情况,明确lncRNAMEF2C-AS1对卵巢癌A2780细胞增殖、侵袭、迁移能力及细胞周期分布和细胞凋亡的影响,从而阐明lncRNA MEF2C-AS1在卵巢癌恶性表型中的生物学功能。4.在卵巢癌A2780细胞中分别转染LV-MEF2C-AS1、LV-NC,培养48h后,Western Blot实验检测各组细胞中细胞周期相关蛋白CyclinD1和细胞调亡相关蛋白Caspase3、Bcl-2、Bax的蛋白水平,明确lncRNAMEF2C-AS1对细胞凋亡相关蛋白及周期相关蛋白的影响,探讨lncRNAMEF2C-AS1调控细胞凋亡及细胞周期的机制。5.LV-MEF2C-AS1、LV-NC 组细胞,转染 LV-MEF2C-AS1 和 LV-NC,48h 后,通过Western Blot实验检测GRB7的蛋白水平,明确lncRNA MEF2C-AS1对GRB7的调控作用。[结 果]1.卵巢癌 SKOV3、OVCAR3 和 A2780 细胞中 lncRNAMEF2C-AS1 的水平显著低于卵巢上皮IOSE80细胞,并且在A2780细胞表达最低(P<0.05)。2.LV-MEF2C-AS1及LV-NC组细胞分别转染lncRNAMEF2C-AS1过表达病毒及阴性对照病毒后,RT-qPCR检测lncRNAMEF2C-AS1的过表达效率。结果表明LV-MEF2C-AS1组的lncRNA MEF2C-AS1水平明显高于LV-NC组(P<0.001),说明过表达慢病毒LV-MEF2C-AS1能显著提高lncRNAMEF2C-AS1的水平,转染效率高,可用于后续实验。3.CCK8实验结果显示,LV-MEF2C-AS1组在48h、72h和96h的细胞活力明显低于LV-NC组(P<0.05);克隆形成实验、划痕实验、Transwell实验显示,LV-MEF2C-AS1组的克隆形成数、细胞迁移能力及侵袭能力均明显低于LV-NC组(P<0.001)。4.流式细胞术检测LV-MEF2C-AS1组和LV-NC组卵巢癌A2780细胞凋亡情况,结果显示LV-MEF2C-AS1组凋亡细胞数、凋亡率显著高于LV-NC组(P<0.05)。5.流式细胞术检测LV-MEF2C-AS1组和LV-NC组卵巢癌A2780细胞周期分布情况,结果表明与LV-NC组相比,LV-MEF2C-AS1组处于S期和G2期的细胞百分较高,而处于G1期细胞百分较低(P<0.05)。6.Western Blot实验检测lncRNAMEF2C-AS1对细胞周期相关蛋白及调亡相关蛋白水平的影响,结果显示LV-MEF2C-AS1组卵巢癌A2780细胞中Bax和Caspase3的蛋白水平显著高于LV-NC组,而Bcl-2和CyclinD1的蛋白水平明显低于 LV-NC 组(P<0.05)。7.Western Blot实验检测卵巢上皮细胞IOSE80和卵巢癌SKOV3、OVCAR3及A2780细胞中GRB7的蛋白水平,结果显示卵巢癌SKOV3、OVCAR3及A2780细胞GRB7的蛋白水平明显高于卵巢上皮细胞IOSE80(P<0.05)。LV-MEF2C-AS1组中的GRB7蛋白水平明显低于LV-NC组,lncRNAMEF2C-AS1能够下调GRB7的蛋白水平(P<0.05)。[结 论]1.LncRNAMEF2C-AS1在卵巢癌细胞中下调,过表示MEF2C-AS1可显著抑制卵巢癌细胞的增殖、侵袭、迁移,在卵巢癌中发挥抑癌基因的作用。2.LncRNAMEF2C-AS1可能通过上调促凋亡蛋白Bax、Caspase-3的水平,下调抗凋亡蛋白Bcl-2和细胞周期相关蛋白CyclinD1的水平,促进卵巢癌细胞凋亡,抑制细胞周期进展。3.GRB7在卵巢癌细胞中高表达,lncRNAMEF2C-AS1能够下调GRB7的蛋白水平,GRB7可能是lncRNAMEF2C-AS1的靶基因。