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目的:观察芩翘四物汤全方组及其拆方组对系膜增生性肾炎(MsPGN)大鼠的治疗作用,对肾组织巨噬细胞炎症蛋白-1α(MIP-1α)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平及肾组织形态学的影响,探讨该方及拆方组可能的作用机制。 方法:本实验以雄性SD大鼠为研究对象,采用从第1日起隔日灌服牛血清白蛋白(BSA)、第8天及第15天尾静脉注射葡萄球菌肠毒素B(SEB)、第1天皮下分点注射完全氟氏佐剂和第8天皮下分点注射不完全氟氏佐剂的方法复制MsPGN大鼠模型。观察芩翘四物汤及其拆方组对大鼠尿红细胞计数、24小时尿蛋白定量、血清肌酐、血清白蛋白的影响;采用免疫组化法检测各组大鼠肾组织中MIP-1α、TNF-α表达水平的变化,光镜下观察各组大鼠肾组织病理形态学改变情况并用病理图像分析系统进行半定量分析。 结果:1)模型组24小时尿蛋白定量、血清肌酐、血清白蛋白均较空白组有显著统计学意义(P<0.01);肾组织MIP-1α、TNF-α表达水平升高,肾脏病理改变以轻中度MC增生和ECM积聚为主,说明MsPGN动物模型复制成功。2)全方组可明显降低模型大鼠24小时尿蛋白定量、血清肌酐,提高血清白蛋白,与模型组相比有显著差异(P<0.05),与清热解毒组、化瘀通络组相比有显著差异(P<0.05);拆方组中清热解毒组作用与化瘀通络组相当,二者与模型组比较无显著差异(P>0.05)。提示各干预组可不同程度地降低大鼠尿蛋白定量及血清肌酐,提高血清白蛋白,作用依次为:全方组>清热解毒组≈化瘀通络组。3)造模后8周模型组大鼠GMC计数明显增多,ECM增生明显,与空白组比较有显著性差异(P<0.01);全方组可明显减轻MsPGN大鼠MC增生,减少ECM积聚,与模型组比较有显著性差异(P<0.01),与清热解毒组比较有显著差异(P<0.01);拆方组中化瘀通络组与模型组相比有显著差异(P<0.05)。提示各干预组对GMC增多及ECM增生均有抑制作用,作用依次为:全方组>化瘀通络组>清热解毒组。4)模型组和各干预组肾组织MIP-1α、TNF-α表达均有增高,与空白组相比均有显著增高(P<0.01),证明MIP-1α、TNF-α参与了MsPGN的发生;全方组MIP-1α、TNF-α表达较模型组显著减少(P<0.01),清热解毒组MIP-1α、TNF-α表达较模型组显著减少(P<0.05),拆方组中清热解毒组作用优于化瘀通络组。提示各干预组对MIP-1α、TNF-α在肾组织的表达有不同程度的抑制作用,作用依次为:全方组>清热解毒组>化瘀通络组。5)肾组织MIP-1α、TNF-α表达水平与GMC阳性细胞数、ECM阳性面积比值呈显著正相关(γ>0.5,P<0.01),提示肾组织MIP-1α、TNF-α表达水平与MsPGN模型大鼠的肾脏病理改变密切相关。 结论:1)MsPGN模型组大鼠24h尿蛋白定量、血清肌酐明显升高,血清白蛋白显著降低,肾组织MIP-1α、TNF-α表达水平升高,肾脏病理改变以轻中度GMC增生和ECM积聚为主。2)芩翘四物汤全方组可明显降低模型大鼠24小时尿蛋白定量、血清肌酐,提高血清白蛋白,起到治疗MsPGN的作用,且优于清热解毒组、化瘀通络组。3)芩翘四物汤全方组、化瘀通络组可减轻GMC增生,减少ECM积聚,作用优于清热解毒组。4)芩翘四物汤全方组、清热解毒组可以下调肾组织炎症因子MIP-1α、TNF-α的表达,作用优于化瘀通络组,这可能是其治疗MsPGN的作用机理之一。上述结果表明,清热解毒、化瘀通络多法合用在MsPGN的治疗中较单一运用更为有效,可从不同作用环节减轻肾脏病理损伤。