随着多肽在生物医药、材料等方面的应用日渐广泛,寻找高效的多肽合成方法成为此类科学研究的关键。1994年,Kent小组最先提出了多肽的自然化学连接法(native chemical ligation,NCL),NCL反应是在缓冲液中C-端竣基硫酯化修饰的多肽片段与N端为半胱氨酸的肽链发生化学选择性反应形成长链多肽的方法。由于半胱氨酸在自然界的丰度较低(1.5%),因此NCL的应用受到限制。为了克服连接位点半胱氨酸的限制,可以在氨基酸上修饰巯基或者含硫基团来实现NCL。但是,此类方法的修饰过程较为复杂,并且需要在连接反应后脱硫。研究人员发展的硫酯直接胺解连接法可以不受半胱氨酸的限制,但是该方法反应速率较慢,产物会发生消旋。因而提高直接胺解的效率是化学合成多肽和蛋白质领域的一个需要解决的难题。因为硒酯具有更强的亲核性且容易离去,硒的衍生物以及硒酯开始被逐渐应用到多肽连接中,因此,我们将多肽C-端羧基修饰为活泼性更强的硒酯,然后与另一条肽链N-端的氨基进行直接胺解反应,以此实现更加高效的多肽片段连接。本论文的主要研究工作为:(1)C-端羧基活泼氧酯、硫酯、硒酯的反应速率对比;(2)硒酯胺解的反应条件的优化;(3)验证硒酯胺解的反应是否生成消旋产物;(4)硒酯胺解反应底物的扩展;(5)硒酯胺解法的应用,如合成肿瘤相关糖蛋白MUC1。本课题的实验结果表明:该方法在水溶液中反应不需要添加剂,并且反应速率快(3-10h),产率高(73%-95%),无消旋产物生成,另外,此方法不受反应位点半胱氨酸的限制。同时,此方法可以成功地应用于合成具有复杂结构的糖肽和蛋白质。