细菌代谢产物是一个重要的活性物质来源,微生物源的免疫增强剂属于微生物源活性物质之一,已经引起越来越多的重视。本实验从东大温泉中分离、筛选出一株嗜高温菌株,活性检测表明该菌株代谢产物可显著性增强鲤的非特异性免疫功能。实验鲤腹腔注入不同纯度的活性成分,以鲤的外周血白细胞吞噬活性、外周血白细胞杀菌活性、血清溶菌酶活性、血清SOD活性、免疫相关基因表达水平和免疫保护率为指标,活性追踪分离免疫增强的有效成分。1菌株分离、筛选和鉴定将来自东大温泉底泥的7株嗜高温菌的发酵上清液制成饲料,分别定时、定量投喂实验鲤,每7天抽血测定活性一次,连续测定4次。实验结果显示,虽然个别菌株也能在一定程度上增强鲤的某一免疫指标,但其活性明显较低,故不做进一步研究。只有菌株SX-4与其他菌株相比可显著性提高鲤的非特异性免疫的各项指标,菌株SX-4很可能产生能显著性增强鲤的非特异性免疫功能的某种活性成分。因此,将菌株SX-4作为本实验目的菌株,做进一步研究。通过菌株个体形态、菌落形态、生理生化特征和分子生物学鉴定得出,菌株SX-4隶属于厌氧芽胞杆菌属（Anoxybacillus）,种有待进一步确定。2嗜高温菌株SX-4免疫增强活性成分初步分离菌株SX-4的发酵的上清液经过不同极性、孔径的大孔吸附树脂（LSA-10、AB-8、H-103、DM130、D101）循环流动吸附24h,再用无水甲醇洗脱,经旋转蒸发仪浓缩得到浸膏,将浸膏制成10mg/ml的实验溶液,腹腔注入鲤体内,每7天抽血测定活性一次,连续测定4次。确定了能有效富集菌株SX-4代谢产物中的免疫增强活性成分的大孔吸附树脂为DM130,为免疫增强活性成分进一步分离、纯化奠定基础3免疫增强活性成分的进一步分离、纯化和结果鉴定大孔吸附树脂DM130吸附菌株SX-4的发酵的上清液后得到的浸膏,经过硅胶柱层析进一步分离,得到的单体和流分段分别腹腔注入实验鲤体内,每7天抽血测定活性一次,连续测定4次。发现只有晶体化合物Ⅰ可显著性增强鲤的各项非特异性免疫性免疫指标,提高鲤的免疫保护率,而其他流分段只能增强鲤的个别非特异性免疫性免疫指标,因此初步确定晶体化合物Ⅰ为菌株SX-4的主要免疫增强活性物质。经理化检测和波谱学分析,晶体化合物Ⅰ被鉴定为环（脯-甘）二肽。