【摘 要】
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被俄罗斯民间奉为“神奇的药物”的桦褐孔菌,因其广泛的功能活性而引发全球学者的关注。本文主要研究桦褐孔菌多糖的高效提取方法、多糖的分离纯化、多糖免疫活性的验证、桦
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被俄罗斯民间奉为“神奇的药物”的桦褐孔菌,因其广泛的功能活性而引发全球学者的关注。本文主要研究桦褐孔菌多糖的高效提取方法、多糖的分离纯化、多糖免疫活性的验证、桦褐孔菌多糖饮品的生产工艺。具体的研究内容及实验结果如下:探究多糖的高效提取方法,主要研究响应面法优化桦褐孔菌多糖的高效提取工艺。首先将桦褐孔菌子实体进行机械粉碎,以此增大浸提时原料与溶剂的接触面积,探究机械粉碎和微波辅助对于多糖得率的影响。选取影响多糖得率的三个重要因素,用响应面法进行工艺优化得到最佳的工艺参数为:微波功率467W、液料比20:1、提取时间为196min。探究多糖的分离纯化,分离主要是脱脂、脱蛋白、脱色、透析,应用四种方法脱蛋白比较效果,Sevage法脱蛋白率最高为86.92%,TCA(三氯乙酸)法为53.07%,酶法85.63%,Sevage+酶法89.27%。然后进行多糖纯化,经DEAE-纤维素层析柱和凝胶色谱层析柱得到不同级分的多糖级分IOP-Ⅰ、IOP-Ⅱ、IOP-Ⅲ、IOP-ⅠA、IOP-ⅠB。验证分离纯化后的多糖级分IOP-ⅠA的免疫活性,通过脏器指数试验、小鼠碳廓清实验和巨噬细胞吞噬试验探究多糖对小鼠免疫器官质量和对非特异性细胞的影响,从而验证多糖的免疫活性。实验结果表明:多糖剂量组可以显著增加环磷酰胺处理后免疫力低下小鼠的脏器指数,巨噬细胞的吞噬指数也增大,从而说明桦褐孔菌多糖具有免疫活性。根据上述实验结果,即多糖具有免疫活性,探究桦褐孔菌多糖作为功能因子的多糖饮品的生产工艺,从而确定具有免疫功能的多糖饮品的最佳配方。实验结果表明,各因素对多糖饮品生产工艺的影响顺序为:桦褐孔菌多糖添加量>绵白糖添加量>柠檬酸添加量>CMC添加量,最佳的生产工艺配方为:桦褐孔菌多糖的添加量为0.40%,柠檬酸的添加量为0.10%,绵白糖的添加量为10%,CMC的添加量为0.40%。所得产品的色泽均匀,组织状态良好,口感佳。
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