泛素结合酶（Ubiquitin conjugating enzyme,E2）是泛素蛋白酶体系统（Ubiquitin proteasome system,UPS）中重要的酶之一,参与植物的生长发育、逆境胁迫、免疫响应等生理活动。本课题组前期通过分析桑脉带相关病毒（Mulberry vein banding-associated virus,MVBa V）侵染的桑树品种‘桂桑优62号’（Morus atropurpurea）转录组获得了3个差异表达的泛素结合酶基因Ma UBC10、Ma UBC20、Ma UBC C。为进一步研究这3个E2基因的功能,本研究验证了其在MVBa V侵染桑叶与健康桑叶中差异表达情况,克隆获得了c DNA序列,进行生物信息学和亚细胞定位分析;通过实时荧光定量PCR检测了在桑苗不同组织、外源激素（ABA、GA、Me JA、SA）和非生物胁迫（低温、高温、高盐、干旱）处理下3个E2基因的表达情况;对其进行原核表达并制备了多克隆抗体,通过免疫共沉淀筛选获得了一批互作蛋白,并利用酵母双杂交技术对部分互作蛋白进行验证。具体研究结果如下:1.3个E2基因在MVBa V侵染桑叶和健康桑叶中的表达情况:Ma UBC10、Ma UBC C在MVBa V侵染桑叶中表达显著上调,分别为健康桑叶中表达量的7.35倍、4.30倍,Ma UBC20表达显著下调,为0.08倍。2.克隆获得Ma UBC10、Ma UBC20、Ma UBC C的c DNA序列。Ma UBC10全长802 bp,其中包含447 bp的编码区,114 bp的5′非翻译区（Untranslated Region,UTR）和241 bp的3′UTR,编码148个氨基酸;Ma UBC20全长1015bp,编码区长546 bp,5′UTR长204 bp,3′UTR长265 bp,编码181个氨基酸;Ma UBC C编码区长567 bp,3′UTR长163 bp,编码188个氨基酸。这3个E2蛋白都含泛素结合（Ubiquitin conjugating,UBC）保守结构域。3.亚细胞定位结果显示这3个E2蛋白定位于细胞质、细胞核。4.表达模式结果显示这3个基因在桑苗的根、茎、叶中均有表达。在不同外源激素、非生物胁迫处理下,3个基因均产生了不同的响应模式:其中Ma UBC10的表达被SA显著诱导,24 h表达量最高,为0 h的15.36倍;Ma UBC20的表达受到了4种非生物胁迫处理的抑制,在高温处理6 h时表达量最低,为正常水平的5%;Ma UBC C的表达被ABA、Me JA显著诱导,24 h时表达量分别为0 h的30.26、8.70倍。5.免疫共沉淀筛选Ma UBC10、Ma UBC20、Ma UBC C互作蛋白,共获得117个,其中包括115个桑树蛋白、2个MVBa V蛋白。选取桑树蛋白E3连接酶Ma RGLG4、病毒蛋白NSm和NSs,利用酵母双杂交技术验证其与E2蛋白的互作情况,结果表明Ma UBC20与Ma RGLG4存在相互作用。本研究表明泛素结合酶基因响应激素信号和逆境胁迫,在MVBa V侵染桑树时参与多种生理活动,为研究桑树UPS在MVBa V侵染桑树过程中的作用机制提供理论依据。