基因转染DKK1对17β-雌二醇促进子宫内膜异位症患者在位子宫内膜间质细胞VEGF和MMP9表达的影响

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目的:利用基因转染pcDNA3.1-DKK1阻断Wnt/β-catenin信号通路,观察对17β-E2作用后子宫内膜异位症(内异症)患者在位子宫内膜间质细胞(Endometrial stromal cell,ESC)血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)mRNA及蛋白表达的影响,探讨Wnt/β-catenin信号通路在介导雌激素促进异位内膜粘附、侵袭和转移中的作用。   方法:体外分离培养内异症患者在位子宫内膜间质细胞(ESC),利用LipofectamineTM 2000,分别将pcDNA3.1-DKK1质粒,pcDNA3.1空载质粒转入ESC。用不同浓度17β-E2处理ESC 48h;此后选用10-10 mol/L17β-E2处理ESC不同的时间,RT-PCR和Western-blotting检测转染DKK1前后ESC VEGF、MMP9 mRNA及蛋白表达。   结果:17β-E2能明显促进内异症患者ESC VEGF、MMP9 mRNA及蛋白的表达,于10-10 mol/L作用48h最明显(P<0.05)。转染pcDNA3.1-DKK1质粒组内异症患者ESC VEGF和MMP-9 mRNA及蛋白表达较空白对照组和空载体组均显著下降(P均<0.05)。   结论:阻断Wnt/β-catenin信号通路能明显抑制17β-E2对内异症患者ESC VEGF、MMP9 mRNA及蛋白的表达。雌激素可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进内异症在位子宫内膜的异位种植。
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