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第一部分自体血输注小鼠脑出血模型成模评估目的:利用二次注射法,建立不同剂量自体血输注的小鼠脑出血模型,评价造模动物的死亡率及神经功能改变。方法:选取C57雄性小鼠104只,经随机分组,应用立体定向仪定位,通过二次注射法将5ul(N=28)、10ul(N=32)、20ul(N=30)不含抗凝剂的自体血注入基底节区,制作不同血肿量的脑出血模型,并以假手术组(N=14)为对照。术后统计各组死亡率,将各组存活小鼠再随机分为3个不同时间点的亚组,分别在术后第1、第2、第3天行前臂放置实验及转角实验。结果:1.成功制作C57小鼠脑出血模型共86只。2.不同注射量的小鼠死亡率无统计学差异。3.各组间小鼠体重无统计学差异。4.前臂放置实验中5ul组、10ul组、20ul组及假手术组小鼠瘫痪侧与自身的健侧相比有明显统计学差异(P＜0.01);5ul组、10ul组、20ul组与假手术组瘫侧比较也显示明显差异(P＜0.01)。瘫侧结果中,5ul组-第2天为同组内最低值(P＜0.05);10ul组-第3天、20ul组-第3天及假手术组-第1天为各自组内最低值(P＞0.05);5ul-第1天与假手术组-第1天无统计学差异。5.转角实验中5ul组、10ul组、20ul组与假手术组LI结果相比有统计学差异(P＜0.05);5ul组-第2天、10ul组-第3天、20ul组-第3天、假手术组-第1天LI分别为各自组内最大值(P＞0.05);5ul-第3天与假手术组-第3天LI无统计学差异。结论:5ul、10ul及20ul三种不同自体血量利用二次注射法均可形成具有明显偏侧神经功能缺损的小鼠脑出血模型,且损伤程度随注射量增加而明显。不同注射血量与小鼠死亡率无关。不同注射血量所致脑损伤最明显的时间点不同,分别为5ul-第2天、10ul-第3天、20ul-第3天及假手术组-第1天。5ul组模型创伤小,恢复快,特异性欠佳。第二部分不同血肿量与神经功能变化的评估目的:估算5ul组、10ul组及20ul组的血肿形成量,评估不同血肿量与神经功能变化的关系。方法:前述成模小鼠19只,5ul组(N=6)、10ul组(N=7)、20ul组(N=6)各自随机分为3个不同时间点的亚组,分别在术后第1、第2、第3天行前臂放置实验及转角实验。取固定后脑组织冰冻切片,行H-E染色,划分血肿范围,估算血肿体积。结果:1.血肿形成情况:5ul组、10ul组及20ul组小鼠均在基底节区形成局限性血肿;血肿实际大小分别为5ul组0.9868±0.2493mm~3,10ul组2.3254±0.3939mm~3,20ul组3.6465±0.6623mm~3。2.神经功能变化与血肿量的关系:随注射量增加三组形成的血肿量逐渐递增(P＜0.01);10ul组、20ul组瘫侧前臂放置均较5ul组差(P＜0.01),但10ul组与20ul组两者之间无统计学差异,与血肿量变化不一致。结论:5ul组及10ul组均可形成与注射量接近的血肿,且神经功能变化与血肿形成量变化相关。20ul组由于操作时返流明显,形成的血肿量及神经功能变化不稳定。第三部分脑水肿程度变化与神经功能变化的评估目的:量化5ul组、10ul组、20ul组及假手术组的脑水肿情况,评估不同脑水肿程度与神经功能变化、不同血肿量与脑水肿程度的关系。方法:前述成模小鼠67只,5ul组(N=18)、10ul组(N=19)、20ul组(N=18)及假手术组(N=12),各自随机分为3个不同时间点的亚组,分别在术后第1、第2、第3天行前臂放置实验及转角实验。取新鲜脑组织,利用干湿重法获得脑组织含水量。结果:1.各组脑水肿情况:5ul组、10ul组、20ul组及假手术组患侧与自身的健侧相比有统计学差异(P＜0.05),10ul组、20ul组患侧均较假手术组有统计学差异(P＜0.05),5ul组患侧与假手术组无统计学差异,各组间健侧脑组织含水量结果无统计学差异;三组患侧最大值分别出现于5ul组-第2天、10ul组-第3天、20ul组-第3天,较自身对侧脑组织及假手术组患侧脑组织有统计学差异(P＜0.05),三者互相无统计学差异。2.神经功能变化与脑水肿程度的关系:5ul组、10ul组及20ul组的神经功能缺损结果较假手术组明显(P＜0.01),且程度逐渐递增;假手术组、5ul组、10ul(P＜0.01)组患侧脑组织含水量结果呈逐渐递增,但20ul组结果较10ul组结果下降(P＜0.05),与神经功能变化不一致。3.不同血肿量与脑水肿程度的关系:血肿量与患侧脑组织含水量在5ul组与10ul组有较好的递增对应关系,而20ul组的变化趋势相反。结论:10ul组及20ul组患侧可形成较假手术组患侧更明显的脑水肿,而5ul组患侧脑水肿不明显。不同注射量的患侧脑水肿程度分别在5ul组-第2天、10ul组-第3天、20ul组-第3天、假手术组-第1天最明显。假手术组、5ul组、10ul组各自的神经功能缺损与患侧脑水肿程度呈良好的对应关系,5ul组与10ul组各自的血肿量与患侧脑水肿程度也呈良好的对应关系;而20ul组由于血肿形成量不稳定,其神经功能缺损及患侧脑组织含水量变化均未能形成对应增加。