牛FABP4基因代谢功能研究及品种间脂肪细胞发育特性分析

被引量 : 0次 | 上传用户:jtgdz
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究旨在通过过表达和干扰技术,从分子水平和细胞水平研究脂肪酸结合蛋白4(FABP4, fatty acid binding protein4)对牛前脂肪细胞分化及脂质代谢相关基因表达的作用。此外,利用和牛与安格斯牛为实验供体,分析比较了两个牛品种皮下脂肪组织的组织学差异及前脂肪细胞体外增殖分化的异同,为培育高品质肉牛品种奠定基础。主要研究内容如下:(1)构建了牛FABP4基因的腺病毒过表达载体与有效的干扰载体,包装后分别获得了高滴度重组腺病毒AD-FABP4与AD-shRNA-261。利用酶消化法分离得到牛原代培养的前脂肪细胞,将腺病毒AD-FABP4与AD-shRNA-261分别感染牛的前脂肪细胞24小时, FABP4基因的mRNA表达水平可分别提高176%(P <0.01)和降低41%(P <0.01),表明AD-FABP4与AD-shRNA-261可用于介导目标基因FABP4的表达研究。(2)利用实时荧光定量PCR(polymerase chain reaction)技术,通过过表达和干扰两个方面,探索FABP4在牛的前脂肪细胞分化及脂质代谢中的功能。研究表明,作为PPARγ(peroxisome proliferator-activated receptor γ)信号通路下游的FABP4基因不能反馈调节脂肪细胞分化相关基因PPARγ、CEBPA(CCAAT/enhancer-binding protein A)及SREBP1(sterol regulatory element binding protein1)表达量的变化(P>0.05);FABP4基因不影响脂质代谢相关基因FAS(fatty acid synthase)及FATP1(fatty acid transportermember1)的表达(P>0.05),但能在转录水平正向调控ADIPOQ(adiponectin)与LEP(leptin)基因的表达(P <0.05)。FABP4在牛的脂肪细胞脂质代谢调控网络中起着重要作用。(3)制备了和牛与安格斯牛的皮下脂肪组织石蜡切片并进行了苏木精伊红(H&E,hematoxylin and eosin)染色,比较了两个牛品种皮下脂肪组织的组织学差异;分离培养了和牛与安格斯牛的原代皮下前脂肪细胞,利用油红O染色技术、实时定量PCR技术、MTT(3(-4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide)检测技术及Westernblotting技术分析比较了两个牛品种的前脂肪细胞增殖分化的差异。分析结果显示,和牛的脂肪组织中成熟脂肪细胞体积较大,脂肪细胞间隙较大;和牛与安格斯牛的原代前脂肪细胞可在体外分化为成熟脂肪细胞,且和牛的前脂肪细胞有积累较少脂质的趋势(P=0.094);和牛PPARγ基因在脂肪细胞mRNA表达水平及脂肪组织蛋白表达水平均低于安格斯牛(P <0.05),在和牛较低的皮下脂肪生成趋势中起重要作用;和牛前脂肪细胞的增殖能力显著高于安格斯牛(P=0.028)且伴随着较高的Erk1/2(extracellularsignal-regulated kinase1/2, P=0.013)活性;FGF2(fibroblast growth factor2)的外源添加可消除两个牛品种间的增殖差异及Erk1/2活性的差异;和牛前脂肪细胞TGF-β3(transforming growth factor β3, P=0.008)和BMP2(bone morphogenetic protein2, P=0.043)基因的表达显著低于安格斯牛,可能在和牛与安格斯牛前脂肪细胞增殖差异中起重要作用。
其他文献
枣缩果病是目前危害枣树果实的主要病害之一,随着种植面积的逐渐扩大和病害的日益加重,造成的经济损失也不可估量,枣缩果病病害的防治成为目前研究的热点以及实际生产所亟待解决
<正>0序言长期以来,市政道路雨水斗都是用黏土实心砖砌筑,现场作业时间长,湿作业工作量大,养护时间长,开槽后较长时间不能回填,施工工期较长,使用几年后黏土砖会酥烂,引起道
目的探讨脐动脉血流数值不同对分娩结果的影响。方法选择2011年3月至2013年3月孕周大于37周的正常妊娠孕妇300例,年龄20~41岁,平均年龄27.71岁。脐动脉血流S/D≥3者49例(病例
近年来,杭州市经济社会发展进入了新的阶段,生活品质之城建设、文明城市创建对全市的消费者权益保护工作提出了新的要求。同时,随着消费者自我保护意识的不断提升、网购等新
某体育场结构形式为混凝土框架-剪力墙和钢结构。为满足体育场内环混凝土结构和钢结构施工要求,运输通道设置在转换梁下方。因此转换梁施工采用桥型支撑结构。重点介绍了模板
该文采用求解非定常RANS方程的方法对螺旋桨三维敞水流场进行数值模拟,利用有限元方法计算螺旋桨结构响应,结合商业软件ANSYS中的流体载荷和结构响应数据实时双向传输技术,实
通过对轿车摇窗机扇形齿轮的设计,说明逆向工程与精确计算相结合,同时也介绍了扇形齿轮的冲压工艺、模具及数控线切割加工方法.通过测量扇形齿轮实样可以直接得到齿顶圆直径
企业投资行为、需求波动以及产能利用率是反映宏观经济整体运行情况的三个重要指标,现有研究表明它们之间存在着复杂的相互影响关系。通过相关实证分析、检验发现:国有企业投
一、实施化学探究性教学的意义 探究性教学起源于美国教育家杜威。他反对赫尔巴特的“教师中心,从课中学”,倡导“学生中心,从做中学”,继而美国教育学家萨其曼、施瓦布和加涅等
我国铁路装备主体机车信号已势在必行,站内电码化设备作为重要控制设备直接关系到列车运行安全和行车效率,必须保障其时刻安全、可靠地运行。目前,站内电码化地面设备尚处于故障