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朊病毒病是一类潜伏期长,可影响多种哺乳动物包括人类的神经退行性疾病,死亡率为100%。Tau蛋白作为一种胞内微管相关蛋白,在多种神经退行性疾病患者脑脊液中显著升高。近年来研究显示神经细胞和非神经细胞能够特异性分泌tau蛋白。这些研究提示患有神经退行性疾病后,细胞可能存在tau蛋白的非常规分泌。但在朊病毒疾病中tau蛋白的分泌情况还未有报道。为了探究朊病毒感染后总tau蛋白的分泌情况,利用朊病毒感染的SMB-S15细胞和其对照细胞系SMB-PS,通过ELISA和Western blot方法检测了细胞裂解液和培养液中总tau蛋白含量。ELISA结果显示与SMB-PS细胞相比,SMB-S15细胞培养液中总tau蛋白含量显著升高。Western blot结果显示与SMB-PS相比,SMB-S15细胞裂解液中总tau蛋白含量显著升高;SMB-PS和SMB-S15细胞培养液中均存在总tau蛋白阳性条带,经与裂解液中总tau蛋白归一化后,SMB-S15细胞培养液中总tau蛋白含量显著高于SMB-PS细胞,再次印证ELISA结果。本研究自行制备了四支抗tau蛋白外显子2和10的单克隆抗体（anti-tE2/10）,并在与抗原结合能力、种属反应性、对朊病毒模型的适应性方面对其进行验证。本研究将制备的单抗应用到ELISA方法中,检测了SMB-PS和SMB-S15细胞培养液中相应tau异构体的含量。结果显示SMB-PS和SMB-S15细胞均能够分泌E2/E10-tau,但是含量均无明显差异。为了探究磷酸化对朊病毒感染的神经细胞分泌tau蛋白能力的影响,通过Western blot实验检测了SMB-PS和SMB-S15细胞培养液中Thr181、Thr205、Ser396和Ser404位磷酸化的tau蛋白（pT181/pT205/pS396/pS404-tau）水平。结果显示pT205/pS396-tau在SMB-PS和SMB-S15细胞中均有分泌,SMB-S15细胞分泌量显著高于SMB-PS细胞;而pT181/pS404-tau不会被分泌到细胞间隙。为了进一步说明tau蛋白分泌与朊病毒复制密切相关,通过ELISA和Western blot技术检测了经白藜芦醇处理7 d彻底消除SMB-S15细胞中的PrPSc后获得的SMB-RES细胞的培养液中总tau蛋白、pT205/pS396-tau含量。结果显示朊病毒清除后,SMB-RES细胞分泌总tau蛋白、pT205/pS396-tau的能力较SMB-S15细胞有所恢复。本研究证明了朊病毒感染后,神经细胞分泌tau蛋白的能力增加。朊病毒的清除能够逆转这种现象。此外tau蛋白外显子2和10的存在可能不是影响朊病毒感染后神经细胞分泌tau蛋白的主要因素,而tau蛋白在不同位点的磷酸化是这一过程的关键影响因素。这些结果有助于解释朊病毒病患者脑脊液中tau蛋白升高的原因,并为理解朊病毒病的作用机理提供理论基础。本研究制备的抗tau蛋白外显子2和10的单克隆抗体特异性高、与抗原结合能力强、适用范围广,将成为了解不同tau蛋白异构体在神经退行性疾病中的作用的有力工具。