论文部分内容阅读
目的:利用基因芯片技术检测T r i c h o s t a t i n A ( TSA)诱导MOLT-4细胞凋亡的基因表达的改变,分析、鉴定、验证与凋亡相关差异表达基因。方法:确定不同浓度、时间TSA处理人白血病细胞株MOLT-4后凋亡发生的进程,选择200nmol/L浓度TSA诱导MOLT-4细胞凋亡,分别收集9、18h时段细胞制备人14K基因表达谱芯片,对基因芯片结果加以分析、筛选,选择差异表达显著的基因STAT5a用RT-PCR和western blot予以验证,并对其机制作初步的探讨。结果:200nmol/LTSA诱导的MOLT-4细胞凋亡在8h启动,于36h达到高峰。分别于9、18h收集细胞,提取RNA后进行基因芯片分析。所得的结果经过生物信息学分析发现,MOLT-4细胞差异表达基因随着TSA作用时间的延长而增加,DAPK3、STK4、TNFRSF25、IER3等一批基因与凋亡的发生相关。选定STAT5a加以验证证实在TSA处理MOLT-4细胞后其基因和蛋白水平一定时间内有不同程度的下调。反义寡核苷酸封闭MOLT-4细胞中STAT5a后经200nmol/L TSA处理,MOLT-4细胞凋亡率较未经反义封闭的TSA处理的MOLT-4细胞有显著上升(p<0.05)。结论:TSA引起MOLT-4细胞基因表达的显著变化,STAT5a介导了TSA诱导的MOLT-4细胞的凋亡。目的:本研究探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂trichostatin A(TSA)联合化疗药物顺铂(DDP)处理人卵巢癌顺铂耐药株C13*的协同效应。材料和方法:MTT法观察TSA、DDP、TSA+DDP对C13*细胞增殖的影响;克隆形成实验分别检测DDP、TSA+DDP处理C13*的克隆形成率;流式细胞仪检测凋亡和分析细胞周期;Hochest33258观察凋亡细胞形态。结果:40 nmol/L TSA处理C13*12 h,细胞的凋亡率为2.99%,MTT显示生长未受明显影响;TSA+DDP组较DDP组C13*对DDP的作用更为敏感,差异显著(P<0.05)。结论:一定浓度的TSA和DDP联合应用可以增强人卵巢癌顺铂耐药株对顺铂的敏感性,为卵巢癌耐药的逆转提供了新的可能途径。