大鼠脑挫伤模型的构建及ApoE与S-100表达的实验性研究

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目的:观察大鼠实验性脑挫伤(brain contusion,BC)后不同时相内S-100蛋白和载脂蛋白E(Apolipoprotein E,ApoE)表达的变化关系,探讨其脑损伤后神经元和神经胶质细胞随脑损伤时间的变化规律,对其在脑挫伤时间推断中的作用作出评价。方法:选取健康Wistar大鼠55只,随机分成正常对照组(n=5)、假损伤组(n=5)和损伤组(n=45)。而损伤组在0.5h、2h、6h、12h、24h、3d、5d、7d和10d等时相点各5只。通过建立大鼠局灶性脑挫伤模型,运用光学显微镜观察脑组织形态学的改变,利用免疫组织化学染色法(SP法)对对照组及伤后不同时间组内脑细胞中的S-100和ApoE两种蛋白进行检测,并作统计学分析。结果:两种蛋白的损伤各组与正常对照组和假损伤组相比较均具有统计学意义(P<0.01)。伤后0.5h组大脑皮质神经元中ApoE即出现显著表达(P<0.01),而S100阳性细胞在伤后2h组开始表达显著增强(P<0.01)。随着损伤时间的延长,ApoE和S-100阳性细胞数目及阳性表达范围逐渐扩大。伤后3d组ApoE阳性细胞表达数量及染色强度达到高峰,且分布广泛,随后表达下降;到5d组时,S-100阳性产物达到高峰,后显著下降,但仍高于对照组。结论:1)经过改进的Feeney氏自由落体撞击法为一种经济可行的制作局灶性BC动物模型的理想方法。2)BC后S-100和ApoE在挫伤灶的表达有一定的时间规律性,均呈现出逐渐升高-高峰-下降的变化,其表达高峰时间基本重叠对应,且两者的表达存在正相关关系,故可以联合用来较准确地推断BC形成的时间。
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