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背景和目的先天性巨结肠(Hirschsprung’s diseas,HD)是小儿外科的常见病,临床症状主要为腹胀、便秘等肠动力障碍表现,以患儿的一部分肠壁缺失神经节细胞为特征表现,近几年有研究发现先天性巨结肠与Cajal间质细胞(interstitial cells of Caja,ICC)减少和细胞间通讯功能障碍有关。ICC是胃肠道平滑肌细胞间的起搏细胞,它们可以产生自发性慢波并介导神经递质传递。ICC之间及ICC与平滑肌细胞之间信号传递由缝隙连接(Gap Junction,GJ)介导,GJ是细胞间信息通讯的主要通道。缝隙连接蛋白是GJ基本构成部分,而缝隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)是人类最重要的缝隙连接蛋白。本实验运用免疫组化方法观察Cx43和ICC特异性标志物c-kit在HD结肠壁的表达情况,并应用电镜技术观察HD结肠壁的ICC和缝隙连接的超微结构,以探讨二者与HD发病的关系。材料和方法1.应用免疫组化方法观察30例HD手术切除标本(分别取狭窄段和扩张段全层组织)和15例正常结肠组织中c-kit和Cx43的表达;2.应用电镜技术观察5例新鲜HD手术切除标本(包括狭窄段和扩张段全层组织)中ICC和GJ的超微结构;3.统计学处理:所得到的计量资料分析采用单因素方差分析,最小显著差法(LSD);定性资料采用x~2检验;有统计学意义者进行x~2分割。显著水准取α=0.05,x~2分割时调整检验水准为α=0.05/3=0.1666。结果1.c-kit在HD狭窄段中的表达明显少于正常对照组和HD扩张段(P＜0.01),在正常结肠和HD扩张段中表达比较差别无统计学意义(P=0.535＞0.05);2.Cx43在HD狭窄段中的表达较正常对照组和HD扩张段明显减少(P＜0.01),而在正常对照肠壁和HD扩张段中表达之间的差别无统计学意义(P=0.458＞0.05);3.扩张段平滑肌及ICC之间可见到缝隙连接,神经节完整,ICC围绕神经节分布。HD狭窄段可见孤立的ICC,其形态及内部结构未见明显变化。结论1.与神经节细胞缺如一样,先天性巨结肠病变肠管缺少Cajal间质细胞是HD的病理改变之一;2.先天性巨结肠病变肠管不仅Cajal间质细胞减少,而且存在缝隙连接蛋白connexin43表达和分布减少;3.ICC和connexin43数目和分布异常可能HD发病的原因之一。